배지제조 실헙결과/ 플라스미드/ DNA

목차

1. 실험방법
2. 실험결과
3. 논의 및 고찰

본문내용

1. 실험방법
1) 전 날 우리가 만든 cell을 1.5mL Tube에 옮긴다.
2) 원심분리기에 4℃, 1300rpm, 3분 동안 원심분리를 시킨다.
3) 원심분리가 끝나면 cell의 밑에 부분인 pellet이 생성되고, 그 pellet이 떨어지지 않게 상층액을 최대한 제거 시킨다.
4) Sol 1(완충용액)을 100uL만큼 덜어 cell에 넣은 뒤 vortex를 이용해 덩어리를 없애준다.
5) Sol 2을 200uL만큼 덜어 cell에 넣은 뒤 inverting(shaking)을 하는데 조금 세게 흔들어 준다. Sol 2는 세포를 깨는 역할을 하고 inverting하고 난 뒤에는 콧물과 같이 끈적해진다.
6) Sol 3을 150uL만큼 덜어 넣어준 뒤 Sol 2보다 반경 범위가 더 크게 흔들어 준다.
7) 원심분리기에 4℃, 1300rpm, 3분 동안 원심분리를 시킨다.
8) 흰색 고체 덩어리가 들어가지 않도록 최대한 조심히 상층액을 새로운 Tube로 옮긴다.(흰색덩어리가 들어갈 경우 Tip을 이용해서 제거도 무방하다)
9) 상층액을 옮겨 담은 Tube에 Ethanol 800uL을 넣는다. 그 후 vortex를 이용해 잘 섞는다.

참고 자료

없음