[서강대학교 현대생물학 실험레포트] LB Plate&Streaking

소개글

LB Plate&Streaking에 대한 서강대학교 현대생물학 실험레포트입니다.

목차

1. Abstract
2. Introduction
3. Materials & methods
4. Results
5. Discussion
6. References

본문내용

Abstract
이번 실험은 LB plate를 만들고 세균 배양 방법 중 하나인 streaking을 연습하는 것이었다. LB 배지는 분자 미생물학에서 plasmid DNA의 제작과 단백질 재조합에 이용되고, E.coli의 recombinant strain을 배양하고 유지하는데 가장 널리 사용되는 배지 중 하나이다. Streaking은 single colony를 얻기 위하여 사용하는 방법으로 E.coli 같은 원핵생물의 대부분과 Yeast같은 진핵생물의 일부는 이러한 방법으로 배지위에서 보관할 수 있다. streaking을 하면 보통 1달정도 냉장보관 할 수 있으며 single colony를 얻으면 변성된 것들의 오염도 피할 수 있는 장점이 있다. 실험 방법은 Tryptone, Yeast extract, Sodium chloride, Agar를 넣고 물 100ml를 첨가하여 LB agar가 잘 녹을 때까지 섞고 autoclave 한 다음 멸균된 petri dish에 분주해서 LB plate를 만든다. Streaking은 플라스틱 loop에 균을 묻혀 줄 긋기를 반복하면서 균의 밀도를 서서히 줄여나갔고, 끝난 후 colony의 관찰을 위하여 incubation을 했다. 다음 날 관찰결과 LB plate는 petri dish안에 고루 퍼져서 굳어 semi-solid상태를 유지하고 있었고, streaking한 petri dish에는 colony들이 자라있었는데 서서히 밀도가 줄어들어 마지막 streaking했던 부분에서는 독립적으로 존재하는 colony들을 관찰할 수 있었다. 주변 환경으로부터의 오염가능성이 높은 실험이라 알코올램프 주변에서 실험을 하긴 했지만 실험과정 중 이물질의 유입으로 plate내에 이물질이 존재할 수도 있고, streaking과정에서 이물질이 들어가 사용한 균이외의 다른 것들이 자랐을 수도 있다. 멸균이 더 잘되는 환경에서 숙련된 기술로 실험에 임했다면 보다 더 만족스러운 결과를 얻을 수 있었을 것이다.

참고 자료

Prescott, Lansing M., 미생물학(6th ed.), 2005, 라이프 사이언스, pp.213-217
Madigan, Michael T., 미생물학(11th ed.), 2006, 월드 사이언스, pp.26-27 pp.57-59