실험3.제한효소처리

소개글

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목차

1. 실험 날짜: 2012년 9월 19일 수요일
2. 실험 장소: 자연관 231호
3. 서론
4. 실험목적
5. 실험재료
6. 실험방법
7. 실험결과
8. 고찰과 의의
9. 참고문헌

본문내용

1. 실험 날짜: 2012년 9월 19일 수요일
2. 실험 장소: 자연관 231호
3. 서론
Stenley Cohen과 Herbert Boyer의 멋진 실험의 기본은 제한효소(restriction endonuclease)라는 매우 중요한 효소가 있어 가능하였다. Stuart Lynn과 Werner Arber가 1960년대 후반에 제한효소를 발견하였는데, 이 효소는 바이러스 DNA와 같은 외부에서 들어온 DNA만을 절단하여 감염을 막는다는 사실에서부터 그 이름이 유래되었다. 즉, 이 효소는 바이러스의 감염대상을 “제한”하는 역할을 한다. 또한 이는 침입한 DNA를 바깥부터 자르지 않고 DNA의 안을 절단하므로 핵산외부가수분해효소(exonuclease)가 아니라 핵산내부가수분해효소(endonuclease)라 불린다. Stuart Lynn과 Werner Arber는 이 효소가 DNA의 특정 부위를 잘라 DNA를 정확히 절단할 수 있는 칼과 같은 역할을 하리라 기대하였으나, 그들이 분석한 효소는 이러한 역할을 하지 못하였다.

<중 략>

8. 고찰과 의의
제한효소를 처리하는 과정에서는 상당히 어려운 점은 없었지만 피펫으로 채취하는 양이 워낙 적어서 팁을 정확히 tube 가운데에 넣고 용액을 옮기는 것이 가장 관건이었다. pGreen TIR 과정에서는 다른 용액들을 다 넣고 멸균수를 넣어서 20을 맞추었고, 반대로 T-vecto는 멸균수 먼저 넣고 10 용액을 만들었다. vortex 하는 기계와 spin을 해주는 기계를 처음 써봤는데, 생각보다 작동법이 어렵지 않았지만 짧게 이용해야 하기 때문에 정확하게 시간을 재고 기계를 작동했다. 전반적으로 10초, 2분, 1시간 이러한 시간들을 되도록 정확히 지키기 위해서 스탑워치로 알람을 측정하여 사용하였다. 두 번째 agarose gel을 만들고 전기영동을 하는 실험에서는 agarose gel이 쉽게 만들어져서 편했다. 하지만 가격이 비싸다고 하니 되도록 실수 없이 실험에 임해야 한다고 느꼈다. TAE buffer는 전기를 통하게 해주는 역할을 한다고 했는데, gel을 만들 때도 필요하고, 전기영동 장치에도 필요했다.

참고 자료

분자생물학. 박상대 역. Robert F.Weaver 저. 라이프 사이언스. 52-53 page
생명과학실험. 김민주 외. 동아대학교 출판부. 171-173page