분자세포, 노던, 서던, 웨스턴 블랏팅, 세포주기, pcr, 하이브리도마 세포, 세포소기관, 세포 내 단백질 생성 및 이동 등등
- 최초 등록일
- 2012.11.25
- 최종 저작일
- 2012.06
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소개글
분자세포, 노던, 서던, 웨스턴 블랏팅, 세포주기, pcr, 하이브리도마 세포, 세포소기관, 세포 내 단백질 생성 및 이동
전기영동, cDNA합성, DNA sequencing, 세포 신호, SDS- PAGE등 거의 모든 전반적인 내용을 알차게 요약했습니다.
목차
없음
본문내용
8.단백질, DNA, RNA의 조작
(1) 세포는 조직현탁액으로 부터 분리될 수 있으며, 다른 타입으로 분리될 수 있다.
- 세포 혼합물을 함유하는 조직으로 부터의 동일한 타입의 세포를 분리하는데 있어서 첫 번째 단계는 세포들을 서로 잡고 있는 세포외 기질을 붕괴시키는 것이다. 실현가능한 분리세포의 최고 생산량은 대개 방금 태어난 조직으로 부터 얻는다. 조직 샘플은 전형적으로 세포외기질의 단백질을 소화시키기 위한 단백질 분해 효소에 의해 다루어지거나, EDTA와 같은 세포와 세포사이의 부착에 의존하는 ca, 배위결합 또는 결합에 관련된 시표에 의해 다루어진다. 그런 다음 조직은 부드럽게 흔들어 줌으로써 단일의 살아있는 세포로 따로따로 떨어지도록 다루어진다. 가장 복잡한 세포분리 기술 중의 하나는 특정세포표지를 위해 형광 염료로 짝지어진 항체를 사용한다. 그런 다음 표지된 세포는 전자적인 형광물질에 의해 활성화된 세포분류기에서 표지되지 않은 세포로 부터 분리될 수 있다. 이 놀랄만한 기계에서 미약한 흐름의 한 가닥 세로줄을 떠다니는 개별적인 세포들은 레이저광선과 각 세포의 형광을 통과하며 이것은 빠르게 측정되어 진다.
<중 략>
- 세포주기조절시스템은 주기적으로 활성화되는 단백질 인산화효소에 근거한다.
세포주기조절시프템에서 Cdks가 매우 중요하다. 이러한 인산화효소의 활성은 주기를 통한 세포의 진보를 향상시키거나 떨어뜨린다. 이러한 규칙적인 두 가지 작용은 세포내의 단백질 인산화를 통해 직접적으로 주기적 변화를 이끈다. 그리고 DNA복제, 체세포분열, 세포질분열과 같은 세포주기의 주요한 부분을 개시하거나 조절한다. 예를 들어, 체세포분열의 시작단계에서 Cdk의 활성이 증가하면, 이는 단백질의 인산화를 증가시키며 염색체의 응축, 방추사 조립 등을 조절한다. Cdk의 주기적인변화는 복잡한 효소집단과 다른 단백질에 의해 조절된다. Cdk 조절에서 가장중요한 단백질은 cyclin이다. Cdk는 이름에서도 암시되는 것과 같이, 사이클린에 의존하여 그들의 활성을 나타낸다. 만약 사이클린에 단단히 결합하지 않는다면 Cdk는 단백질 인산화효소의 활성을 나타내지 못한다. Cdk의 모양은 일정하지만(일정농도존재) cyclin의 모양은 주기적으로 바뀌는데 이는 cyclin- Cdk 복합체의 조립과 활성을 야기시킨다. cyclin- Cdk 복합체는 최초로 발견된 MPF(성숙유도인자, M기 유도인자)로 불리며, MPF활성의 최고점이 사이클린 농도의 최고점과 일치한다.
참고 자료
없음