크로마토그래피

소개글

크로마토그래피

목차

1. 서론
1.1 실험목적
1.2 이론적 배경
1.2.1 Gel chromatography
1.2.2 겔 베드의 총 부피
1.2.3 세파덱스와 여러 가지 겔 크로마토그래피
1.2.4 여러 가지 크로마토그래피


2. 실험방법 및 기구
2.1 실험기구 및 시약
2.2 실험방법
2.1.1 Gel chromatography
2.1.2 Ion-exchange chromatography


3. 결과
3.1 Gel chromatography
3.2 Ion-exchange chromatography


4. 토의
4.1 Gel chromatography(Sephacryl S-300)
4.2 Ion-exchange chromatography


5. 참고자료

본문내용

1. 서론
1.1 실험 목적
물질을 분석하는 크로마토그래피에는 이온교환크로마토그래피, 얇은막 크로마토그래피, 겔크로마토그래피등이 있다. 이중에서 겔 크로마토그래피와 이온교환크로마토그래피를 이용하여 물질의 분자량이나 성분을 분석하는 원리를 알아보고 그 원리에 따른 효과와 활용 범위를 알아본다.

1.2 이론적 배경

겔 크로마토그래피
1.2.1 겔 크로마토그래피
겔 크로마토그래피는 겔 여과(gel filtration) 또는 겔 침투(gel permeation) 크로마토그래피 라고한다. 겔 여과 크로마토그래피(이동상은 물)라는 명칭은 생화학자들에 의해 사용되며, 겔 침투 크로마토그래피(이동상은 유기용매)라는 명칭은 고분자화학자가 사용한다. 겔 크로마토그래피는 정지상에 분자체를 사용하는데 이들은 세파덱스(Sephadex), 폴리아크릴아마이드(polyacrylamide) 또는 아가로오스(agarose) 겔로서 친수성이므로 물을 흡수할 수 있고 팽윤된다. 시료 분자의 크기가 팽윤된 겔의 최대 구멍(pore)보다 클 때는, 그 분자는 겔 입자를 통과하지 못하므로 정지상 입자의 공간을 통해서 컬럼 밖으로 나온다. 보다 작은 분자는 겔 입자의 열린 구멍 속에 들어가나 그 크기와 모양에 따라서 통과하는 속도가 다르다. 그러므로 분자의 크기가 감소하는 순서로 용출된다.

<중 략>

4. 토의
4.1 Gel chromatography(Sephacryl S-300)
겔 크로마토그래피 실험은 3인이 한조가 되어 실험하였다. 우리는 S-300 겔 크로마토그래피를 사용하였고 사용된 sample안에는 Blue dextran, Ferritin, Hemoglobin, Vitamin B12이 들어있으며, 각각 파란색, 갈색, 붉은색, 핑크색을 가지고 있다. 실험 결과를 보면 파란색은 쉽게 확인이 가능하나, 나머지색은 구분하기 매우 어렵다.
처음에는 결과를 7번 well을 Blue dextran의 최고점, 16번 well을 Vitamin B12의 최고점으로 분석하였으나 그렇게 단순히 보기에는 몇 가지 문제가 있었다. 문제가 되는 몇 가지는 Blue dextran과 Vitamin B12사이에는 4개의 빈 well(sample 없이 buffer만 들어있는 well)만 보이는데, 이 4개의 well에 Ferritin, Hemoglobin이 나오기에는 무리가 있고(색도 없다), Blue dextran에 비해 Vitamin B12가 나오는 범위가 너무 넓고, 나온 색이 사전지식으로 알고 있었던 Vitamin B12의 색인 핑크색이라고 하기에는 너무 진했다.

참고 자료

http://blog.naver.com/tsngwow?Redirect=Log&logNo=50024736168