DNA 분리와 분석

소개글

DNA 분리와 분석

목차

1. 서론
1.1 실험목적
1.2 이론적 배경
1.2.1 DNA
1.2.2 제한효소
1.2.3 Agarose Gel Electrophoresis
1.2.4 buffer
1.2.5 Agarose gel 농도에 따른 분리범위

2. 실험방법 및 기구
2.1 실험기구 및 시약
2.2 실험방법
2.1.1 식물 DNA 분리
2.2.2 동물 DNA 분리
2.2.3 박테리아 DNA 분리
2.2.4 Analysis of DNA

3. 결과
3.1 식물, 동물 DNA 분리
3.2 Quantitation of DNA
3.3 DNA Digestion 결과

4. 토의

5. 참고자료

본문내용

1. 서론

1.1 실험목적
이 실험은 식물, 동물, 박테리아세포로 부터 DNA를 분리하고 제한효소를 이용하여 DNA를 자르고 Spectrophotometer와 Electrophoresis를 이용하여 DNA를 분석한다. 실험은 2주에 걸쳐 진행되며 1주에는 식물, 동물, 박테리아로부터 가각의 DNA를 분리하고, 2주에는 분리된 DNA를 Spectrophotometer와 Electrophoresis를 이용하여 DNA를 분석한다.

1.2 이론적 배경
1.2.1 DNA
이중의 긴 폴리뉴클레오티드 사슬로 구성되어 있으며, 2개의 폴리뉴클레오티드 가닥이 퓨린과 피리미딘의 염기결합으로 2중나선을 이룬다 (→ 염기쌍). 구아닌염기(퓨린)는 시토신염기(피리미딘)와 3중 수소결합을 하며, 아데닌염기(퓨린)는 티민염기(피리미딘)와 2중 수소결합을 한다.
당(디옥시리보오스)은 인산 이에스테르 결합으로 뉴클레오티드를 연결하여 각 DNA 가닥의 뼈대를 이룬다. 염기는 소수성(疏水性)이 커서 두 가닥의 DNA 안쪽에 체적되며, 두 DNA 가닥은 2중나선 구조를 이룬다. 인간세포의 DNA는 일직선으로 폈을 때 약 2m가 되며, 인간을 구성하는 세포들 전체에서 DNA를 분리하여 연결하면 지구와 태양 사이를 연결하고 다시 돌아올 수 있을 만한 길이가 된다.

<중 략>

4. 토의
1주 실험에서는 3명씩 한조가 되어 각각 식물, 동물, 박테리아의 DNA 분리하였다. 식물DNA를 분리한 팀원을 제외한 나머지 조는 충분한 양의 DNA를 분리하였다. 하지만 식물DNA를 분리한 팀원의 결과는 좋지 않았다. 실험결과에 대해 정확한 원인을 말하기는 어렵지만, 몇 가지 원인을 찾아보면, 상층액을 다른 튜브로 옮기는 과정과 아스피레이터를 하는 과정에서의 미숙함과 잎을 가루로 만드는 부분에서 시약으로 DNA를 분리할 만큼 충분히 가루로 만들지 못한 점 등이 있다.
2주 실험은 1주 실험에서 분리한 식물, 동물, 박테리아 DNA의 양과 제한효소를 이용하여 자른 후 전기영동을 통해 DNA를 분석하는 실험을 하였다. Spectrophotometer를 이용하여 DNA의 순도를 측정한 결과 1.733 이 나왔으며, 꽤 순수한 DNA라고 말할 수 있다. DNA Digestion한 결과를 보면 표본(M)에서 보이는 Band 패턴은 보이지 않고 전체적으로 뿌린 것 같은 결과가 나왔다. 만약 제한효소에 의해 잘려진 DNA라면 잘려진 특정한 부분들만 band이 형태로 나왔어야 한다. 하지만 Bnad의 형태를 찾기 힘들므로 DNA를 추출할 때에 DNA들이 잘게 부서진 점이 원인이라고 생각된다.

참고 자료

- 생물화학, John R. Holum, 아카데미서적, 1989. 1.20, PAGE 159-161
- 위키백과사전