BCA 단백질정량

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단백질 정량은 왜 하는이유
Wide type cell과 Mutant cell 사이의 특정 단백질 양 발현에 차이 여부를 확인하기 위해서!
효소의 활성을 측정하기 위해서!

본문내용

실험 목적
단백질 정량법들의 기본적인 원리를 이해하고, 시료 속에 포함된 단백질의 양을 측정할 수 있다.

실험이론
정량분석과 정성분석
정량분석(Quantitative analysis)
시료의 화학적 성분량을 분석하여 물질의 순도나 조성을 알아내는 분석법
정성분석 (Qualitative analysis)
물질을 구성하고 있는 성분의 종류를 알아내는 분석법

실험이론
정량법
분석 방법에 의한 분류
기기분석: 물리화학적인 기계 기구를 사용해서 수행. 조작이 간단하고 정밀도가 높고 개인차가 적음 ex) 질량분석법, 기체크로마토그래피
화학분석: 화학반응을 이용해 성분의 양을 결정ex) 용량분석, 기체분석, 미량분석
단백질 정량
: 시료 내에 포함된 단백질의 양, 또는 농도를 구하는 과정

실험이론
단백질 정량은 왜 하나?
Wide type cell과 Mutant cell 사이의 특정 단백질 양 발현에 차이 여부를 확인하기 위해서!
효소의 활성을 측정하기 위해서!

실험이론
Methods of Protein assay
Bradford assay
Biuret test
UV assay
Lowry assay
BCA assay

Bradford assay
단백질과 결합시 Coomassie Brilliant Blue G-250의 산성 Solution의 최대흡광도가 465nm에서 595nm로 옮겨지는 것을 관찰한다.
Hydrophobic하고?ionic한 상호작용들이 염색물질의 anionic form을 안정화시키면서, 눈에 보이는 색의?변화를 유발
4000이상의 펩타이드나 단백질을 모두 측정할 수 있다.
석영 큐벳과 반응을 하기 때문에 유리 또는 플라스틱 큐벳을 사용해야 한다.

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없음

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