Protein assay

소개글

실험목적
미리 단백질 농도를 알고 있는 standard용액을 이용하여 sample의 단백질 농도를 구한다.

목차

실험목적

이론

실험재료

실험 기구 및 장치

실험방법

참고문헌

본문내용

1) The Biuret assay

두개 이상의 펩티드 결합을 가지고 있는 단백질은 알칼리성 용액에서 묽은 황상구리로 처리했을 때 자주색을 띠는 물질을 생성한다. 색깔은 구리원자가 두개의 펩티드 결합에서 오는 네개의 –NH기 사이에서 배위화합물(coordination complex)를 형성함으로써 생기는 것으로 생각된다.
뷰렛 실험은 단백질의 펩티드결합을 이용하는 방법이므로 모든 단백질에 대해서 재현성이 좋고 빠르다. 또한 다른 물질들의 영향을 덜 받는다. 그러나 감도가 1mg/ml정도로 낮다.

2) Lowry assay
biuret법과 조합하여 감도를 좋게 발전시킨 방법이다. 단백질 용액은 알카리성 조건하에서 구리이온과 반응시킨 다음 폴린시약을 첨가한다. 그러면 구리에 의하여 phosphate molybdenum acid-tungsten acid complex가 환원되어 파랗게 발색이 된다. 이는 펩티드 결합 및 트립토판 잔기, 티로신 잔기에 의한 페놀 시약의 환원 반응이다.

참고 자료

http://cafe.naver.com/goondae/367387
http://alth0808.blog.me/20111560478
http://www.cyworld.com/1q8q0q0q/12781489
http://cafe.naver.com/reportshine/27234
http://www.google.co.kr/url?sa=t&rct=j&q=bca%20assay&source=web&cd=1&sqi=2&ved=0CEYQFjAA&url=http%3A%2F%2Fwww.piercenet.com%2Fbrowse.cfm%3FfldID%3D02020101&ei=xryHT43rN4mXiAf_8MDMCQ&usg=AFQjCNFC1OIiswNBOjlvfGwbAMQVjSG7XA&cad=rjt
http://www.koramlabtech.co.kr/web/bbs/board.php?bo_table=21&wr_id=37