실험보고서6-enzyme activity`
- 최초 등록일
- 2012.06.23
- 최종 저작일
- 2012.05
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목차
1. Date
2. Title
3. Object
4. Materials & Equipments
5. Principle
6. Methods
7. Result
8. Discussion
9. Reference
본문내용
2) Specific activity of enzyme
Activity(활성)란 용어는 용액 중의 효소의 총 단위에 적용된다. Specific activity는 단백질 1mg 당 효소의 단위수가 된다. 비활성은 효소의 순도에 대한 척도가 되며 효소가 정제됨에 따라 증대되는데, 효소가 순수하게 되면 비활성은 최대가 되고 일정하게 된다. 각 정제 단계를 거친 다음, 그 시료의 활성(단위)을 측정하고 단백질 총량을 각각 따로 측정하여 계산한 그 비율은 specific activity를 나타낸다. 일반적으로 활성과 총량은 각 단계가 진행됨에 따라 활성은 감소하는데, 이것은 항상 어느 정도의 손실이 있기 때문이며 또한 단백질의 불활성화나 크로마토그래피의 재료 또는 용액 중에 있는 다른 분자들과 비이상적인 상호작용으로 인하여 생기는 것이다. 총 단백질 양은 감소하게 되는데, 그것은 원하지 않는 비특이적인 단백질을 가능한 한 많이 제거하는 목표가 있기 때문이다. 어떤 성공적인 단계에서 비특이적인 단백질의 손실은 활성의 손실보다 훨씬 크다. 따라서 총 활성이 떨어져도 specific activity는 증대된다.
참고 자료
Brad ford Assay 원리 - http://deviliana.blog.me/130033135401
Michaelis-Menten enzyme kinetics -
http://terms.naver.com/entry.nhn?docId=933361
olorimetric determination of alkaline phosphatase activity -
http://en.wikipedia.org/wiki/Para-Nitrophenylphosphate
Specific activity & 미하엘리스-멘텐식 - David L. Nelson, 2010, 레닌저 생화학, 제 5판, 월드사이언스, p.91-92, p.195-199
Lineweaver-Burk equation -
http://terms.naver.com/entry.nhn?docId=425192