Plant DNA extraction에 대한 서론, 실험방법 그리고 실험결과 및 고찰
- 최초 등록일
- 2012.06.14
- 최종 저작일
- 2012.06
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소개글
고추잎을 사용하여 식물 유전체에서 DNA를 추출한 실험 보고서입니다.
목차
서론
실험재료 및 방법
실험결과 및 고찰
인용문헌
본문내용
서론
핵산의 분리는 유전공학에서의 가장 기본적인 기술 중 하나이며 유전자 발현 양상 및 메커니즘 연구에 중요하게 사용된다(남상욱 그리고 권혁빈, 2008). 그러므로 핵산의 분리 방법을 아는 것을 필요로 하였다.
DNA 분리방법에 있어 효과적으로 실시하기 위해서는, 단백질이나 RNA와 같은 불순물을 포함하지 말아야 하며 분리효율이 높아야 하고, 분리 도중 DNA의 구조나 성질을 변화시키지 않아야한다. 즉, 분리과정에서 DNA가 분해되거나 단일가닥으로 변성되지 말아야한다. 그리고 분리과정이 너무 복잡하거나 많은 시간이 걸리지 않아야한다(남상욱 그리고 권혁빈, 2008). 기본적인 분리방법은 세포용해, 단백질과 RNA의 제거, DNA 추출과 분리된 DNA의 양과 순도 측정 등 4개의 단계를 필수적으로 가진다(남상욱 그리고 권혁빈, 2008). 이러한 과정에서 주의 할 사항은 먼저 언급했던 것과 같이 DNA의 물리적인 절단 및 손상과 DNAse에 의한 화학적 분해이므로, 심한 현탁과 같은 물리적인 힘을 가하지 않도록 하며 모든 용액과 기구를 멸균하거나 DEPC와 같은 DNAse 억제제를 첨가하여 DNA 분자가 분해되지 않도록 해야 한다(남상욱 그리고 권혁빈, 2008). 그리하여 우리는 이번 실험에서 DNA를 추출함에 있어 특히 물리적인 충격에 특히 주의 하며 실험을 실시하였다.
여러 가지 세포들 중에서 우리는 식물세포를 이용하여 DNA를 추출하였는데, 핵산의 분리는 여러 연구에 중요하게 사용되나 특히 식물 유전체 DNA는 서던 블롯 분석, 유전체 라이브러리 제작 및 유전체 PCR 등에 필수적으로 이용된다(권혁빈 외 4명, 2011). 이때, 사용한 식물은 고추 잎으로 실험을 실시하였다.
DNA 분리에 있어서 식물세포는 동물세포와는 달리 셀룰로오스와 펙틴 등의 섬유소를 함유한 단단한 세포벽으로 둘러싸여 있어 식물세포로부터 유전체를 분리하는 방법은 동물이나 박테리아로부터 유전체 DNA를 분리하는 것에 비해 어렵다(남상욱 그리고 권혁빈, 2008).
참고 자료
1) 남상욱 그리고 권혁빈 2008. 유전공학의 이해. 라이프사이언스. 35-38
2) 권혁빈 외 4명 2011. 생명과학 실험서. 180-182