[생화학실험] Gene Cloning

소개글

Gene Cloning에 대한 실험 후 작성한 보고서입니다.
이론, 그림 잘 넣었으니 도움 많이 되실겁니다.
실험방법, 정말 상세히 썼습니다.
다만, 고찰 부분은 비어있으니 참고하세요^^

목차

1. 실험제목

2. 실험목적

3. 실험이론
★ Gene cloning의 과정

4. 실험재료 및 방법
-실험재료-
-실험방법-
[ligation]
[Mini-prep : DNA plasmid purification Kit]
[Enzyme cutting]

5. 실험결과

6. 고찰 (비어있음)

7. 참고자료

본문내용

1. 실험제목: Gene Cloning

2. 실험목적: 지난 시간에 이어 Gene cloning에 관해 공부하고 실험을 해 본다.

3. 실험이론
★ Gene cloning의 과정
Ⅰ. 원하는 유전자준비
: Gene Bank에서 유전자 검색 → Genomic DNA분리 → PCR → PCR product 정제

Ⅱ. 얻은 유전자를 vector에 삽입
: PCR에서 사용한 Taq DNA polymerase를 비롯해서 DNA polymerase는 DNA를 5`에서 3` 방향으로 합성하므로 template가 끝나는 부분에서 합성이 끝나 blunt end인 PCR product가 형성될 것을 예상하지만 실제로 PCR product의 모습은 다른 blunt end DNA와는 다른 특성이 있다.
① Primer의 5`쪽에는 phosphate가 없다
: DNA의 5`에는 phosphate가 있으나 PCR 반응 산물의 5` 끝은 우리가 넣어준 primer로 이 primer의 5` 끝은 phosphate가 없다. Primer를 만드는 in vitro DNA synthesizer로 DNA를 함성하는 과정은 생체 내에서와는 달리 3`쪽에서 5`쪽으로 되는데, 이 과정에서 5`의 phosphate가 붙을 수 없기 때문이다.

참고 자료

한국생화학회, 1999, 실험생화학, 개정3판, 탐구당
http://blog.naver.com/tnshrl0728?Redirect=Log&logNo=90003095707