SDS-PAGE

소개글

실제로 실험을 한것으로써 원리와 방법 결과등 많은 사진들을 부착하여 도움이 되실꺼예요,

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본문내용

SDS PAGE
(sodium dodecylsulfate polyacrylamide gel electrophoresis)

1) 실험의 이론 및 목적
Acrylamide를 가교제 (cross-linker)로 중합한 polyacrylamide gel은 acrylamide와 가교제의 농도 및 비율에 의해 gel내 미세통로의 크기를 조절할 수 있어 다양한 크기의 생체 분자들을 분리할 수 있을 뿐만 아니라 높은 정밀도와 고분해 능력으로 인해 오래 전부터 단백질, 핵산 등의 분리에 널리 사용돼 왔다.
자세히 말하자면, 단백질은 각각 자신의 독특한 질량과 PI값이 있다. sds- page는 이 두 요소 중에서 질량의 차이를 이용한 분리방법으로써, sds라는 detergent를 이용하여 모든 단백질이 동일한 (-) 전하를 띄도록 만든 후 질량에 의한 polyacrylamide gel 상에서의 이동속도 차를 이용하여 분리하게 된다. sample buffer에 DTT나 mercaptoethanol이 첨가되어 있어서 disulfide bond도 끊어지게 되어 단백질의 일차구조를 형성하여 이동하게 된다. 이로 인해 우리는 단백질이나 핵산 등의 분자량을 알아낼 수 있으며 구분할 수도 있다. sds page에는 separating gel 과 stacking gel 로 나누어져있다.
separating gel은 PH8.8을 가지고 있어서 빠르게 sample이 지나가게 도와주고
stacking gel은 PH 6.8을 가지고 있어서 우리가 sample을 gel에 넣어주면 그것의 모양을 평평한 선으로 만들어 준다.

참고 자료

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