단백질 정량분석의 종류

소개글

단백질 정량분석의 종류와 실험방법에 관한 레포트입니다.
과목점수 A＋ 였습니다.

목차

단백질 정량분석

A. 단백질 정량분석을 하는이유

B. 단백질 정량분석의 방법

a. Bradford Assay
-정의 및 원리
-실험방법

b. Radio Immuno Assay, RIA
-정의 및 원리
-실험방법

c. Lowry Assay
-정의 및 원리
-실험방법

d. A280 (분광학적 정량법)

e. Bicinchoninic Acid Assay, BCA

f. Biuret reaction

c. 출처

본문내용

단백질 정량분석

1. 단백질 정량을 하는 이유

단백질 정량이란 시료 내에 포함된 단백질의 양, 또는 농도를 구하는 과정으로써 대부분의 생화학실험의 기본이 되는 과정이라고 할 수 있다.
생물학 분야의 경우 다른 분야보다 결과를 볼 때까지 뭔가 잘못되었다는 것을 알기 어려워, 준비 단계에서의 단백질 정량이 잘 못 이루어지면 헛수고를 하거나 잘못된 결과를 얻을 수 있다. 이러한 이유 때문에, 단백질 정량을 정확하게 하는 것은 매우 중요하다. 또한, 정확성뿐만 아니라 대부분의 실험에서 반복적으로 사용하게 되므로 간편성 역시 중요하게 여겨지기 때문에 실험에 따라서 다양한 단백질 정량방법이 사용되고 있다.

2. 단백질 정량분석의 방법

1) Bradford Assay


-정의 및 원리

UV-Visible spectrophtometer를 이용, 흡광도를 측정하여 standard물질인 BSA(Bovine Serum Albumin)나 BGG(Bovine Gamma Globulin)를 기준으로 자신의 시료에 단백질이 얼마만큼 들어있는지 측정하는 방법 중 하나이다.
신속하고 간편하게 단백질을 정량할 수 있어 널리 쓰인다. Dye로는 Coomassis dye에 결합하는데 이결과로 reddish/brown form(465nm에서 최대 흡광)이던 dye는 blue form(610nm에서 최대 흡광)으로 스펙트럼 이동이 일어나게 된다. 두 가지 form의 차이는 595nm에서 최대가 되는데, 따라서 이 파장이 Coomassie dye-protein complex의 blue form을 측정할 수는 있지만 595nm에서 측정한 것보다 측정되는 흡광도 값이 10%정도 낮아지게 된다.

참고 자료

출처:
http://blog.naver.com/trial319?Redirect=Log&logNo=60127912244
http://blog.naver.com/tjgmlapdlf?Redirect=Log&logNo=100089712902
http://rarorilove.blog.me/30036524989
http://blog.naver.com/moonygirl?Redirect=Log&logNo=120116221784
http://blog.naver.com/go3952?Redirect=Log&logNo=80072050377