분광광도계

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※ 분광광도계(Spectrophotometer)
Fig 1. 분광광도계(Spectrophotometer)
분광계(spectrometer)는 복사선의 세기를 전기신호로 전환할 수 있는 변환기와 연결된 단색화 장치 또는 다색화 장치를 사용하는 분광학적인 기기이다. 일반적으로 빛(백색광)이 물체에 닿으면 그 빛은 물체의 표면에서 반사, 물체의 표면에서 조금 내부로 들어간 후 반사, 물체에 흡수, 물체를 통과하는 빛으로 나누어지는데 물체에 의하여 흡수되는 빛의 양은 그 농도에 따라 다르다. 그러므로 이와 같은 빛의 흡수현상을 이용하면 시료용액 중의 빛을 흡수하는 화학물질의 양을 정량할 수 있다. 이와 같이 시료용액, 또는 적당한 시약을 넣어 발색시킨 용액의 흡광도법이라고 하는데 주로 자외선(ultraviolet,180~320nm) 및 가시광선(visible,320~800) 영역에서 빛의 흡수를 이용한다. 빛이 시료를 통과하게 되면 시료에 의하여 빛이 흡수되기 때문에 빛의 강도는 약해진다. 분광광도계(Spectrophotometer)는 흡광도를 측정하는데 필요한 두 빔의 복사력의 비를 측정할 수 있는 분광계이다. 분광광도계는 파장이 연속적으로 변화하여, 흡수 스펙트럼을 측정할 수 있다. 광도계(photometer)는 적당한 복사선 변환기와 연결된 파장 선택을 할 수 있는 필터를 사용한다.
-파장의 선택 : 분광광도법으로 측정할 때 최대감도를 얻기 위해서는 단위 농도당 흡광도의 변화가 가장 큰 곳인 분석물의 흡수 봉우리 파장과 같은 파장에서 측정하여야 한다. 더욱이 흡수곡선은 보통 최대점에서 평평하여 Beer의 법칙에 잘 따르며, 기기의 파장설정을 정확히 재현하지 못해서 생기는 오차에 대한 가능성을 줄이게 한다.
-흡광도에 영향을 미치는 변수 : 물질의 흡수 스펙트럼에 영향을 주는 변수에는 용매의 성질, 용액의 pH, 온도, 높은 전해질의 농도, 방해물질의 존재 등이 있다.

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