생화학실험 western blot 3

소개글

실험레포트입니다.

목차

1. 실험주제

2. Date

3. Object

4. Principle

5. Data & Result

6. Discussion

본문내용

4. Principle

①Western blotting
Western blotting은 단백질의 확인과 characterization에 가장 효과적인 방법이다. 이 방법은 polyacrylamide 젤 전기영동 후 membrane으로 transfer 시켜, 분리한 특정 단백질 동정에 항체 특이성을 이용한다. Western blotting에는 특정 단백질, 특정 단백질을 인식하는 1차 항체, 그리고 1차 항원과 결합하면서 확인할 수 있는 signal을 만드는 2차 항체가 필요하다. 오랫동안 방사성 동위원소를 사용하여 확인하였으나 이런 방사성 동위원소를 사용하는 것보다 덜 위험하고 사용이 편하면서도 유사한 민감도를 가지는 새로운 방법들이 사용되고 있다. 이런 새로운 방법에는 light-based detection 방법, autoradiography방법이 있다.

② PDVF membrane
PVDF 는 hydrophobic 하기 때문에 hydrophilic 하게 만들어야 buffer에 젖을 수 있습니다. hydrophilic 하게 만드는 방법은 hydrocarbon을 가진 alcohol에 적시는 것입니다. alcohol(-OH)에 적시게 되면 hydrocarbon은 membrane에 붙게 되고 hydrocarbon을 따라 위쪽으로 -OH 꼬리가 나오게 됩니다. -OH 꼬리는 극성을 가지고 있어서 hydrophilic 역할을 하게 됩니다.

참고 자료

없음