Gene Cloning
- 최초 등록일
- 2011.09.21
- 최종 저작일
- 2010.05
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소개글
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목차
※목차
1. 실험 목적
2. 실험 방법 및 과정
1) 염분노출(저염분)
2) 해부
3) RNA 추출하기
4) RNA 농도 측정
5) cDNA 합성
6) PCR(Polymerase chain reaction) - 유전자 증폭 단계
7) 전기영동
8) Gel Purification
9) Ligation
10) Transformation
11) Pick up
12) 집균
13) 효소처리
3. 실험 결과
4. 고찰
본문내용
Gene Cloning
1. 실험 목적
- Gene cloning을 통해 DNA를 자르고 붙이고 변형시켜서 실험에 필요한 재조합 DNA(recombinant DNA)를 제조하고 Southern, Northern, cell culture 실험 등에 사용해야 할 생체 내 유전자를 얻을 수 있을 뿐만 아니라 기본적인 효소의 처리와 DNA의 분리 및 조작방법을 배울 수 있다. 그리고 정상과 저염분 노출시킨 fish의 DNA를 비교 분석한다.
2. 실험 방법 및 과정
- 실험 대상 : Cinnamon Clownfish, 농어목 자리돔과, 열대성 해수어
1) 염분 노출(저염분)
① 실험 설계 - 35(Control) → 17.5 psu
② 처리 시간 - 24h
③ Sampling - 1조 : Control, 2조 : 17.5 psu
뇌, 아가미, 간, 장, 근육, 생식소 채취
2) 해부
해부하기 위하여 마취제로
Cinnamon Clownfish를 마취하는 단계
마취된 Cinnamon Clownfish의 모습
(무게 4.7g, 전장 6cm, 체장 4.5cm, 체구 2.5cm)
해부를 할때 항문을 따라 잘라나간다.
(내장 파괴를 보호하기 위해 최대한 겉으로만 자른다)
Sampling인 뇌, 아가미, 간 장, 근육, 생식소 채취한 모습
각각 튜브에 조직을 넣고 on ice(초저온 -80℃)상태로 보관한다.
(실온에서 보관하면 조직이 파괴되기 때문이다)
참고 자료
없음