PCR 반응, PCR product 확인(DNA 전기영동), PCR Product Purification 및 확인 (DNA 전기영동)

소개글

이 실험은 Template DNA를 PCR 시키고 DNA Product를 Purification(정제)시켜 전기영동으로 확인하는 것이다.

목차

1. 실험개요
2. 실험 내용 및 결과 분석
- PCR(polymerase chain reaction)
-PCR product 확인(DNA 전기영동)
-PCR Product Purification 및 확인 (DNA 전기영동)

본문내용

1. 실험개요
이번 실험은 Template DNA를 PCR 시키고 DNA Product를 Purification시켜 전기영동으로 확인하는 것이다. 먼저 DNA 서열.........................었으면 이제 DNA만을 정제하여 다시 전기영동으로 우리가 원하는 DNA가 있는지 확인한다.

2. 실험 내용 및 결과 분석
- PCR(polymerase chain reaction)
이번 실험은 PCR 반응을 이용하여 Template DNA를 증폭시켰다. 우리에게 주어진 Template DNA 가 너무 적었기 때문에 PCR 로 증폭---------------------으로 결합할 수 있다. 또한 프라이머의 상보성으로 인해 자기들끼리 결합하지 않도록 한다. GC 함량은 50%전후로 설계를 하고 프라이머의 2차구조의 형성을 방지해야한다.
프라이머는 증폭시킬 DNA 부위에 특이적으로 결합하도록 하여 DNA 합성이 각 프라이머로부터 시작하여 반대쪽 DNA의 프라이까지 합성 되도록 한다. 즉, 새로운 프라이머가 결합하는 자리에 새 DNA가 합성될 수 있다. 이를 다시 가열하여 원래 DNA 가닥과 새로 합성된 DNA 가닥이 분리되도록 가열하고 다시 프라이머가 결합하여 PCR이 반복되도록 한다. PCR 결과 특정 DNA를 증폭 시킬 수 있다.

<실험 준비물 및 방법>

DNA template(1~2ng)

참고 자료

없음