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[미생물학]【A+】대장균군(coliform bacteria) 검출

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최초 등록일
2011.07.19
최종 저작일
2011.07
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목차

1. Principle

2. Materials

3. Methods
1) 추정시험

2) 확정시험

3) 완전시험

본문내용

1. Principle
물에서 대장균군이 존재하는지를 알아내기 위한 추정시험(presumptive test), 확정시험(confirmed test), 완전시험(completed test)의 3단계 시험방법이 있으며 이들 시험은 분석중인 각각의 표본에서 연속적으로 실행된다. 이 실험을 통해 분변성 오염의 지표로서 그람음성이며 lactose를 발효하여 37℃에서 24시간 동안 배양을 통하여 확인할 수 있는 산과 가스를 생산하는 비포자형성 간균인 콜리형 세균이 존재를 확인할 수 있다.
추정시험은 대장균군의 탐침에 있어서 특이적이다. 가스관을 거꾸로 집어넣은 lactose fermentation broth에 시험하고자 하는 물시료를 넣어 물속에 존재하는 콜리형 세균이 탄소원으로 lactose를 이용하는 것을 관찰하는 것이다. 대장균군이 아닌 다른 세균들은 lactose를 탄소원으로 이용하여 자랄 수 없는데 이 배지에는 lactose에 부가하여 표면장력 저해제와 담즙이 포함되어 있어 이들 성분이 다른 세균들의 생장을 억제하며 산의 생성을 확인하기 위한 pH 지시약도 포함되어 있다.
Lactose 배지튜브에 10, 1, 0.l ㎖의 물시료를 각각 접종하는데 각 물시료는 적어도 3개균으로 구성되며 각 물시료는 3~10개의 튜브로 구성된다. 각 group에서 튜브는 아래 방법에서 설명된 것처럼 명시된 양의 물시료를 접종한다. 각 group당 배지튜브의 수가 많을수록 시험의 민감성은 더욱 커진다. 튜브에서 가스가 발생하면 그 시료에서 대장균군이 존재한다는 추정을 할 수 있는데 추정시험에서 가스를 생성한 양성반응 튜브의 숫자로부터 MPN (most probable number) index를 이용하여 물시료에 존재하는 미생물의 수를 계수할 수 있다.

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