[미생물학]【A+】대장균 에서 DNA 추출

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목차

1. Principle

2. Materials

3. Methods

본문내용

1. Principle
대부분 세균의 염색체 DNA는 환상으로 이루어져 있으며 세균의 종류에 따라 그 크기가 매우 다양하게 나타난다. 현재 가장 작은 크기는 Mycoplasma genitalium에서 유래된 염색체로 알려져 있으며 그 크기가 0.58 Mb이다. 많은 수의 세균에서 염색체 DNA의 크기는 약 400~600 Mb에 이르는 것으로 밝혀져 있으며, 예외적으로 방선균인 Streptomyces coelicolor 염색체 DNA는 선상구조를 하고 있으며 크기가 8.66 Mb에 이르는 것으로 밝혀졌다. 이들 세균으로부터 염색체 DNA를 분리하는 전반적인 과정은 플라스미드를 분리할 때와 유사하나 염색체 DNA 크기가 훨씬 크기 때문에 물리적 충격에 의해 깨지기 쉽다. 따라서 배양액으로부터 얻어진 세균 세포를 용균(lysis)시킨 후부터 염색체 DNA를 분리하는 각 단계마다 상당한 주의를 필요로 한다. 가능한 분해가 덜 된 염색체 DNA를 얻는 것은 유전자 클로닝, 유전자 증폭 등의 실험을 성공적으로 수행하는데 필수적인 요소라 할 수 있다.

2. Materials
Tube 50㎖, poly glove, 천칭 저울, 삼각 플라스크 100㎖, 유리봉, 유리 pipette, shaker, centrifuge, STE 용액, 25% SDS, NaCl, chloroform, isoamyl alcohol, 95% ethanol, SSC 용액
Bacteria : E. coli

참고 자료

없음