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Cell transformation

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최초 등록일
2011.07.13
최종 저작일
2010.09
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소개글

ㅇㅇ

목차

1. Purpose
2. Introduction
3. competency
4. Transformation
5. Artificial competence
6. LB medium
7. Selective media
8. Minimal media
9. Result

본문내용

Purpose
Ligation 과정을 통해 Hei10 서열을 cloning 시킨 vector로 cell을 transformation 시키고, 그 결과를 번식한 colony를 통해 확인하는 실험을 하였다. vector를 competent cell 내부에 일련의 실험과정을 통하여 주입하였다.

Introduction

생명공학의 발달로 인슐린의 대량생산이 가능해졌다. 이는 직접 췌장세포에서 인슐린을 추출하지 않고, 대장균에 인슐린 서열을 주입하여, 인슐린을 직접 생산하게 함으로써 가능해진 것이다.
이번에는 이 과정에 필수적인 기술중 하나인 transformation 실험을 하였다. 이는 GFP-Hei10을 발현시키고, Fluorescence Microscopy를 통해 그것의 발현을 관찰하는 실험과정의 일부였다.
먼저, trnasform이 되기에 용이한 competent cell을 준비하였고, 이 cell에 vector를 transformation 시켰다. 그 다음, cell을 배지에 spread 시켜서, transformation 결과를 vector 내부의 marker 인 저항성 유전자를 통해 확인하였다.
그리고 실험에 관한 이론들에 대하여 알아보았다.

competency
competence는 한 세포가 외부 DNA를 내부로 들여올 수 있는 능력이다. natural competency와 artificial competency로 구별되는데, natural competency는 bacteria 세포가 원래부터 DNA를 자연적으로 들여올 수 있는 능력을 의미하고, artificial competency는 실험실 환경에서 DNA가 cell 내부로 더 잘 유입되도록 유도하는 것을 의미한다.
Regulation of competence
실험실 환경에서 natural competence는 외부 환경요인에 의해 조절된다. regulation of competence에 관해서는 아직 알려진 바가 많지는 않다. (2) 그래도 몇 가지 알려진 바에 의하면 세균은 competence를 촉진할 수 있는 spore를 형성할 수가 있다.

2^ Solomon JM, Grossman AD (1996). "Who`s competent and when: regulation of natural genetic competence in bacteria". Trends Genet. 12 (4): 150–5

참고 자료

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