[동물생리학실험]3.실험결과의측정

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Exp 3. 실험결과의 측정
1. Result
[ Figure 1. 기관별 조건에 따른 DNA추출 agarose gel 결과 (marker size는 맨 마지막이 250bp이고 밑에서 두번째가 500bp이다.) : Control testis와 epididymis는 각각 흐리게 genomic 밴드가 나타났다. Saline을 처리한 testis는 하얗게 여러 개의 밴드가 끊어진 모양의 ladder현상이 일어났으며, Saline을 처리한 쥐의 epididymis는 밴드의 ladder현상 없이 끌려서 나타났다. 물리적 거세 ORX를 한 쥐의 epididymis의 경우에도 마찬가지로 밴드가 끌려서 나타났다. ]
2. Description
지난번 실험에 화학적 거세와 물리적 거세 방법으로 인한 기관들의 형태나 조직을 살펴보고 추출하였다. 이번에는 추출된 조직에서 DNA를 추출하여 총 DNA량의 증감을 알아보고 DNA 분절 존재 여부를 확인함으로써 세포자연사 또는 세포괴사가 일어난 정도를 측정하는 실험이다. 조직 내의 DNA 추출을 위해서는 추출하고자 하는 조직을 갈아서 lysis buffer와 함께 e-tube에서 균질화 시킨다. 조직은 도구를 사용하여 잘게 갈아주며 근육조직은 잘 갈아지지 않으므로 기계를 사용하기도 한다. 균질화된 샘플에 RNase A solution을 첨가 후 incubation함으로써 조직에 RNA를 제거시켜주는데 이때 RNase의 양은 매우 소량이기 때문에 e-tube 벽면에 묻으면 완전히 섞이지 않을 수 있으므로 첨가 시 tip을 용액 안에 잠기게 넣고 투여하도록 한다. PPT buffer와 vortexing 후 원심분리 과정을 거치면 아래층에는 단백질이 위층에는 우리가 원하는 DNA가 녹아있는 buffer로 분리된다.

참고 자료

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