PCR

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PCR
( Polymerase Chain Reaction
; 중합효소 연쇄반응 )
2007010804
1. Pre-report
주 제 : PCR(polymerase chain reaction) 수행
목 적 : 전기영동을 통한 PCR 증폭을 확인하고, agarose gel을 직접 만들 어본다.
원리 및 이론
< PCR ; 중합효소 연쇄반응 >
: DNA의 원하는 부분을 복제·증폭시키는 분자생물학적인 기술로, 사람의 게놈과 같은 매우 복잡하며 양이 지극히 미량인 DNA 용액에서 연구자가 원하는 특정 DNA 단편만을 선택적으로 증폭시킬 수 있다(대장균이나 효모 같은 생물에서는 잘 사용되지 않는다). 또한 증폭에 필요한 시간이 2시간 정도로 짧으며, 실험 과정이 단순하고, 전자동 기계로 증폭할 수 있기 때문에, PCR과 여기서 파생한 여러가지 기술은 분자생물학, 의료, 범죄 수사, 생물의 분류 등 DNA를 취급하는 작업 전반 에서 지극히 중요한 역할을 담당하고 있다.
PCR의 첫 번째 단계는 DNA를 변성(Denaturation)시키는 것이다.
두 가닥의 DNA는 가열함으로써 분리시킬 수 있다. 분리된 각각의 DNA는 주형 (Template)으로서 역할을 하게 된다. 변성 온도는 DNA 내에 있는 G+C의 양과 길이에 따라 달라진다. PCR의 두 번째 단계는 어닐링(Annealing)이다. 이 단계에 서는 시발체(Primer)들이 주형 DNA에 결합을 하게 된다. 어닐링 온도는 반응의 정확성을 결정하는 중요한 요소인데 만약 온도를 너무 높게 하면 시발체가 주형 DNA에 너무 약하게 결합되어서 증폭된 DNA의 산물이 매우 적어진다. 또 만약 온 도를 너무 낮게 하면 시발체가 비특이적으로 결합하기 때문에 원하지 않는 DNA가 증폭될 수 있다.

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