세포 생화학 및 실험 Preparation and Characterization of Plasmid DNA

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세포 생화학 및 실험 Preparation and Characterization of Plasmid DNA

목차

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본문내용

▣ Plasmid DNA의 분리 및 동정
(Preparation and Characterization of Plasmid DNA)
Ⅰ. Purpose
1. Plasmid의 구조와 특성을 숙지한다.
2. Bacterial culture로부터 plasmid DNA의 분리법을 숙지, 숙달한다.
3. 분리된 Plasmid DNA의 동정법을 숙지, 숙달한다.
Ⅱ. Principle
1. Vector(유전자 운반체)
①유전자 운반체
②이용하는 이유
잘라낸 제한절편 DNA만 세포에다 넣기도 어렵고 넣어도 증식하지 못한다. 그러나, vector DNA말단과 제한절편 DNA 말단은 상보적 결합 (서로 같은 접착성 말단을 가지므로)을 하기 때문에 사용한다.
③ 재조합 DNA : 접착성 말단의 상보적 결합과 DNA 연결효소의 작용으로 목적하는 유용
한 유전자를 가진 vector DNA.
④ vector는 제한절편 DNA를 자신의 DNA에 끼워 넣을 수 있어야 하고, 기주 세포 내로 쉽게 들어갈 수 있어야 하며,(CaCl2 처리로) 기주 세포 내에서 자기증식을 해야 한다. 또한 재조합 DNA를 식별할 수 있는 표지형질을 가지고 있어야 한다.
vector에는 plasmid와 phage lamda(λ파지)등이 있다.

참고 자료

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