BLOTTING

*미*

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최초 등록일: 2002.07.29
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2. 방법
제일 먼저해야 할 DNA추출은 말초혈액 백혈구로 부터 얻는 방법이 용이하고 대량 얻을 수 있다. 얻어진 DNA를 유전자 제한효소로 소화시킨 다음 한천 겔 전기영동을 하면 절단 유전자의 길이에 따라 분리된다. 겔 내에서의 이동거리는 DNA의 분자량에 반비례한다. 전기영동이 끝나면 겔에 있는 DNA를 흡착지에 전이시켜야 한다. 겔에 있는 모든 DNA가 흡착지로 이전되었기 때문에 소식자와 DNA보합결합을 용이하게 할 수 있다. 흡착지에 있는 절단 유전자 수는 수 십만에서 수 백만에 이르기 때문에 원하는 유전자를 찾기 위해 소식자의 도움이 필요하다. 우선 유전자에 표지를 하여야 하는데, 32P가 많이 사용된다. 흡착지의 DNA와 소식자 사이의 보합결합을 위하여, 적당한 크기의 비닐주머니에 흡착지, 반응액과 표지소식자를 넣어 사방을 봉한 다음 적당한 온도에서 반응시킨다. 흡착지-소식자 결합위치와 상응하는 곳에 X-선 필름이 감광되기 때문에, 찾고 싶은 DNA띠의 숫자 및 분자량을 확인할 수 있다.

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