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소개글

DNA재조합(재조합DNA기술)의 발현, DNA재조합(재조합DNA기술)의 과정, DNA재조합(재조합DNA기술)의 안정성, DNA재조합(재조합DNA기술)의 기술, DNA재조합(재조합DNA기술)과 유전공학, DNA재조합의 사례 분석

목차

Ⅰ. DNA재조합(재조합DNA기술)의 발현

Ⅱ. DNA재조합(재조합DNA기술)의 과정

Ⅲ. DNA재조합(재조합DNA기술)의 안정성

Ⅳ. DNA재조합(재조합DNA기술)의 기술

Ⅴ. DNA재조합(재조합DNA기술)과 유전공학

Ⅵ. DNA재조합(재조합DNA기술)의 사례

참고문헌

본문내용

Ⅰ. DNA재조합(재조합DNA기술)의 발현

비록 어떤 유전자가 성공적으로 대장균 내에 도입되었다 하더라도, 세균이 꼭 그 단백질을 대향 생산하는 것은 아니다. 즉, 세균세포 내에서 고등생물의 유전자산물을 만들어내는 데는 여러 가지 장애가 있다. 고등생물의 유전자산물이 세균 내에서 생산되기 위해서는 첫째, 세균의 RNA중합효소가 인식할 수 있는 조절부위와 프로모터서열에 고등생물의 유전자가 연결되어야 한다. 진핵생물과 원핵생물 유전자의 조절부위는 전혀 다르다. 이 문제의 해결방법은 강력하게 발현되는 세균의 프로모터와 진핵세포 유전자의 아미노산 합성부위를 연결시키는 것이다.
또 다른 문제는 진핵세포와 원핵세포 내에서 단백질이 발현되는 방법이 다르다. 예를 들면, 사람세포에서 인슐린은 3개의 시스틴 결합을 가지고 있는 하나의 커다란 폴리펩티드 사슬이 단백질 분해효소에 의해 결합되어 인슐린이 생성된다. 그러나 대장균은 커다란 단백질을 자를 수 있는 효소를 갖고 있지 않을 뿐만 아니라 그것이 일정한 형태로 접힐 수 있도록 하는 기작도 가지고 있지 않다. 이 문제를 해결하기 위해 두 폴리펩티드가 각각 분리된 상태로 생산되도록 유전자를 조작하고, 그 유전자로부터 만들어진 재조합된 단백질들을 세포로부터 정제하여 생체 외에서 서로 결합되도록 한다.
재조합 DNA를 가진 플라스미드를 박테리아에 침투시키면 박테리아는 새로 받은 플라스미드 유전자의 단백질을 생산할 것이다. 그러나 재조합 플라스미드가 침투한 박테리아와 침투하지 않은 박테리아를 구별할 수 있어야 하고 또 침투한 플라스미드가 원하는 재조합 DNA를 가진 플라스미드인지 구명할 수 있어야 한다. 몇 가지 방법이 있으나 가장 간단한 방법을 사용하려면 특정한 배지에서 성장할 수 없는 숙주세균을 사용하여야 한다. 재조합 플라스미드가 그런 배지에서 성장할 수 있는 유전자를 가지고 있으면 재조합 유전자를 받은 세균만이 자랄 수 있다.
세균세포 안에 있는 플라스미드가 외부유전자를 가지고 있어도 이것이 전사되고 단백질을 합성하려면 또 다른 조건이 충족되어야 한다. 실제 단백질의 암호가 되는 구조유전자(structural gene)의 앞에는 이의 전사를 조절하는 조절유전자의 뉴클레오티드가 있어야 전사를 시작할 수 있고 구조유전자 DNA의 발단에는 전사를 정지시키는 “정지” 신호의 뉴클레오티드가 있어야 한다. 원하는 유전자를 사용되는 시작 신호와 정지 신호가 그대로 사용될 수 있다. 그 결과 원하는 단백질과 원래의 절단된 단백질의 일부가 함께 만들어진다. 이 잡종 단백질은 차후에 생화학적으로 절단하여 순수 단백질로 만들 수 있다.

참고 자료

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