6. 그람염색법과 박테리아 관찰_예비

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일반생물실험

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1. 그람염색(Gram staining)방법과 그 원리
⑴ Gram staining의 원리
: 덴마크의 세균학자 Christian Gram은 1884년 Gram 염색법에 의하여 세균을 크게 그람양성균과
그람음성균으로 분류했다. Gram 염색의 주된 원리는 확실히 밝혀지지 않았지만 현재 가장
일반화된 이론은 그람양성균의 세포벽에는 Magnesium ribonuclate라는 산성 물질이 있어 염기성
염료인 crystal violet와 결합하여 알코올에 탈색되지 않고 자색(violet color)으로 염색되고
그람음성균의 세포벽에는 magnesium ribonuclate가 없어 탈색제인 알코올에 의해 탈색된 후
대조 염색인 safranin-O에 의해 적색으로 염색된다. 그람 요오드 용액은 매염제로 사용되며
crystal violet이 magnesium ribonuclate와의 결합을 촉진시켜주는 역할을 한다. 그람 염색과 같은
감별 염색방법은 세균학적 측면에서 매우 중요한 기술 중의 하나이다.
⑵ 염색 방법
① 염색 : 염기성 색소인 crystal violet으로 염색. (1분간)
② 착색 : 염색된 세균에 iodine 용액을 처리하면 crystal violet과 iodine이 반응하여 세포 내에
불용성 복합체(CV-I)를 형성. (1분간)

참고 자료

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