SDS-PAGE후, Western Blotting으로 Rotavirus VP4 capsid protein추출

소개글

하나하나 실험해가며 도출된 결과를 바탕으로 작성한 소중한 실험 결과 레포트입니다. 학교에서 우수 보고서로 추천될 만큼 잘 쓰여졌고, 실험 결과뿐만이 아니라 실험 방법, 실험 원리, 그리고 실험을 이해하기 위한 사전 지식까지도 기재되어 있습니다. 물론 실험 결과와 그에 따른 분석도 기재되어 있으므로 필요한 주제와 일치되시다면 결제 후에 후회하시는 일은 없으실 것입니다. ^^*

목차

없음

본문내용

Introduction
- 1. Western blotting, Detection
Western blot은 여러 단백질의 혼합물로부터 어떤 특정단백질을 찾아내는 기법으로서, 찾고자 하는 단백질에 대한 항체를 사용하여 항원-항체 반응을 일으킴으로써 특정 단백질의 존재여부와 크기를 알 수 있는 기술이다. 여러 단백질을 SDS, Urea 또는 2-mercaptoethanol과 같은 환원제로 용해시킨 후 SDS-polyacrylamide gel 전기영동한 후 Coomassie brilliant blue나 Silver stain으로 염색하여 전기영동으로 분리된 단백질 band를 확인하거나 nitrocellulose 또는 nylone membrane에 옮긴 후(단백질을 옮기는 이 과정을 western blot 또는 western transfer라고 한다) 단백질이 옮겨진 membrane에서 항원-항체 반응을 이용 특정 항체에 대한 항원(단백질)을 찾아내는 기법이다. 이때 사용하는 항체는 찾고자 하는 항원(단백질)에 대해 특이하게 반응하는 것을 방사성 동위원소로 표식하여 사용하거나 또는 특정 효소(실험에 사용한 horseradish peroxidase 외에도 alkaline phosphatase도 사용된다.) 또는 형광을 나타내는 색소(예: FITC: fluorescein isothiocyanate)를 결합시킨 것을 이용함으로서 찾고자 하는 적은 양의 단백질을 가시화할 수 있다.
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참고 자료

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