western blot실험보고서
- 최초 등록일
- 2010.11.27
- 최종 저작일
- 2010.07
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소개글
쥐의 gapdh를 분리하여 western blot한것입니다.
실험방법, 사진, 고찰, 참고자료까지 꼼꼼하게 적혀 있습니다
목차
1. introduction
2. materials and methods
3. results
4. discussion
본문내용
1. introduction
western blot은 protein immunoblot 이라고도 하는데 단백질의 존재, 발현 양, 크기를 확인할 수 있는 수단으로서 antibody-antigen반응을 이용한다.
실험 조건에 의해 유전자의 발현량이 어떻게 변하는지를 비교할 때 세포내에서 발현량이 잘 변하지 않는 유전자를 기준으로 연구하고자 하는 대상을 비교하게 된다
세포내에서 구조 유전자나 생명현상에 필수적인 대사에 관여하는 유전자 등은 세포의 조건에 따라 발현량이 잘 변하지 않는 것들이다. 이렇게 세포내에서 거의 항상 발현되면서 그 발현량이 세포의 조건에 따라 잘 변하지 않는 것을 house keeping gene이라 하는데 잘 알려진 house keeping gene으로 GAPDH가 있다.
GAPDH는 Glyceraldehyde 3-phosphate dehydrogenase의 약자로 세포에서 필수적인 대사과정인 glycolysis에 관여하는 효소이다. GAPDH는 각각의 실험 조건에서 template가 되는 RNA 나 단백질량을 동일량 사용했는지를 보여주는 기준이 되어 intra cellular control로 사용한다. 이번 실험에서는 이렇게 control로 자주 사용되는 GAPDH를 western blot 으로 확인하는 과정이 이루어 진다.
참고 자료
1. lehninger principles of biochemistry (4th edition)
2. sherwood Klandorf yancey Animal physiology
3. http://blog.naver.com/rarorilove?Redirect=Log&logNo=30036524989
4. alberts, bray essential cell biology (2nd edition)
5. http://bric.postech.ac.kr/
6.http://my.netian.com/~jeojoon/sds-page.htm