단백질 전기영동법 (SDS-PAGE) 실험

소개글

SDS-PAGE(SDS-polyacrylamide gel electrophoresis) 법을 사용하여, 미지의 단백질의 양을 분석하고, 전기영동의 원리를 이해한다.

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그리고 실험과정에서 생길 수 있는 의문에 대한 답은 다 적었습니다.

목차

1.서론(A.실험목표, B.이론)
2.재료 및 방법
3.결과
4.고찰
5.참고문헌

본문내용

1.서론
A. 실험목표 : SDS-PAGE(SDS-polyacrylamide gel electrophoresis) 법을 사용하여, 미지의 단백질의 양을 분석하고, 전기영동의 원리를 이해한다.

B. 이론
- 전기영동이란?
단백질, 핵산과 같은 전하를 가진 고분자 물질을 전기장이 걸린 매질(gel)에서 이동시켜 분리하는 방법이다.

- SDS란?
Sodium Dodecyl sulphate. (C12H25NaO4S : M.W 288.38). 계면활성제로, 단백질을 둘러싸 음전하를 띠게 만드는 시약이다. 계면활성제는, 친수성인 부분과 소수성인 부분으로 나뉘어 있으며, 이 실험에서는 SDS가 단백질을 둘러싸 전하를 띠게 한다.

- SDS-PAGE란?
SDS-discontinuous polyacrylamide gel electrophoresis. 단백질 전기영동법 중 하나로, 두 개의 gel을 사용하는 불연속적인 방법. 1970년 Laemmli에 의해 개발되었다. 이 방법을 사용하면 단백질을 분자량에 따라 구분할 수 있으며, 많은 용적의 시료를 로딩하더라도 좋은 해상도를 얻을 수 있다.

- Protein folding : 펩티드 사슬이 접히면서 고차구조를 형성하는 현상. 3차구조부터 나타나며, S-S 결합 혹은 수소결합 등으로 인해 접히는 현상이다.

- GEL
이 실험에서는 두가지 gel을 사용하였는데 pH의 변화로 인해 다른 특성을 나타낸다.
Stacking gel : pH 6.8을 띠는 gel. 이러한 gel 안에서는 glycin의 일부만 - 전하를 띠게 되어 단백질의 이동속도를 동일하게 해준다.
Running gel : pH 8.8을 띠는 gel. glycine이 완전히 이온화 되며 단백질이 분자량에 따라 이동하게 한다.

- Buffer
이 실험에서 두 가지 버퍼를 사용하였으며, pH를 유지하고 단백질을 외부환경으로부터 보호하는 효과가 있다.

참고 자료

일반생물학실험 / 경희대 생물학과|한양대 생명과학과 교수진 공저 / E*PUBLIC
BIOLOGY Eighth Edition / CAMPBELL 외 / Benjamin Cummings
분자생물학 / Robert F. Weaver / 라이프사이언스
(임상)분자생물학 / 김은중 외 / 고려의학