Double Mutant

소개글

두 개의 돌연변이 주에서 수컷과 자웅동체 C. elegans를 각각 채취한뒤 교배하고, PCR을 통해 double-mutant의 존재를 확인해본다.

목차

1. 실험목적
2. 실험원리
3. 실험방법
4. 결과 및 고찰
5. 참고문헌

본문내용

1. 실험목적 : 두 개의 돌연변이 주에서 수컷과 자웅동체 C. elegans를 각각 채취한뒤 교배하고, PCR을 통해 double-mutant의 존재를 확인해본다.

2. 실험원리 : Double mutant는 두 개 이상의 다른 mutation을 상대로 교배를 시켰을 때, 2가지 이상의 mutant가 염색체의 같은 유전자 자리에 위치할 때 만들어진다. (by crossing two mutants homozygous for different mutations)

3. 실험방법 :
<Double mutant 제작>
1. Materials
▶ NGM media
▶ C. elegans 돌연변이 주
2. Method
1) 두 개의 돌연변이 주를 각각 관찰하여, 수컷과 자웅동체를 구별한다.
2) 수컷이 더 많이 존재하는 돌연변이 주를 선택하여, 수컷만 선별하여 새로운 배지에 옮겨준다.
3) 나머지 돌연변이 주에서는 자웅동체만을 선별하여, 수컷이 있는 배지에 함께 옮겨준 다. 이때 수컷의 비율이 더 높도록 해야 한다. (수컷이 5마리라면, 자웅동체는 3마리)
4) mating이 일어날 수 있도록 incubator에서 배양한다. (일주일)

참고 자료

웜베이스(http://wormbase.org)
lin-44 gene(http://wormbase.org/db/gene/gene?name=WBGene00003029;class=Gene)
rnt-1 gene(http://wormbase.org/db/gene/gene?name=WBGene00004393;class=Gene)