Recombinant DNA Technology 발표 자료

소개글

Recombinant DNA Technology 발표 자료

목차

실험 제목
Recombinant DNA Technology
Discrimination of sex chromosome by PCR

2. 실험 목표
* PCR과 Gel Electrophoresis의 원리와 사용법을 이해한다.
* 구강 상피세포에서 DNA를 추출하여 PCR 증폭하고,
Gel Electrophoresis로 확인한다.

3. 이론 및 원리
* Polymerase Chain Reaction
* Gel Electrophoresis
* Staining DNA in agarose gels

4. 시약 및 기기

5. 실험 과정
* 시료 준비
* PCR
* Gel Electrophoresis

본문내용

1985년Kary Mullis에 의해 고안되었다.

‘DNA 주형의 denaturation’, ‘primer annealing’, ‘polymerase에 의한 DNA 합성’의
세 단계를 여러 번 반복함으로써 미량의 DNA 주형으로부터 원하는 DNA 부위를
대량으로 얻는 방법이다.

PCR의 최적 조건은 각각의 PCR 반응마다 다르며,
최적의 PCR 효율을 위해서는 각각의 반응조건들을 맞춰 주어야 한다.

초기 PCR 법은 매 cycle 마다 효소를 첨가하는 불편한 방법이었으나,
90℃ 이상에서 활성을 잃지 않는 내열성 Taq polymerase를 사용하면서부터
PCR을 자동으로 수행하는 기계의 개발이 이루어졌다.


PCR Cycle의 개략도


① Denaturing at 94-96°C.
② Annealing at (eg) 68°C.
③ Elongation at 72°C
P=Polymerase
④ 첫 번째 cycle이 끝남.
⑤ cycle이 반복되면서
특정부위의 DNA가
증폭됨.

참고 자료

없음