평판계수법

소개글

시료 내에 존재하는 세균의 수를 평판계수법으로 측정한다.

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본문내용

Purpose : 시료 내에 존재하는 세균의 수를 평판계수법으로 측정한다.
Materials : 고체배양배지 , test tube, 0.85% 식염수, pipette, tip, 알코올 램프, 라이터, spreader, clean bench, incubator, vortexer, 알코올

Method:
1. 계수하고자 하는 세균의 셈플을 준비한다.
2. 알코올 램프를 켜준다. (실험은 언제나 알콜램프 주변에서 이루어 져야한다.)
3. 세균원액 1ml을 pipette을 이용하여 식염수 9ml이 들어있는 test tube에 넣고 뚜껑을 닫아 vortexer를 사용해 잘 섞어준다. ( vortexer를 사용해 섞어 줄 때에는 마개의 입구 주변에 손을 대지 않도록 한다. 오염의 가능성.)
4. 이 과정을 똑같이 4번을 반복해 희석 시켜준다.
5. 마지막 test tube에서 다른 test tube와 양이 같아지게 하기위해 pipette를 이용해 1ml를 버린다.
6. 각각의 test tube에서 pipette를 이용해 0.1m씩 취하여 각각의 평판배지에 떨어트려 준다.
7. spreader를 알코올 램프에 달구어 준 후 알코올에 spreader를 담궜다가 빼서 다시 알코올에 소독해 준다.
8. spreader를 배지 끝 쪽에 대어보고 식었는지 확인한 후 배지에 꼼꼼하게 도말한다.
9. 37도씨 incubator에서 18 시간 배양한다. (습기가 떨어지는 것을 방지하기위해 뚜껑이 아래로 가도록 놓고 배양한다. )
10. 평판에 나타난 colony를 계수하고 균의 형태, 색 등을 관찰한다.

참고 자료

http://academic.naver.com/view.nhn?doc_id=7856778
http://blog.naver.com/loveda01?Redirect=Log&logNo=80027938223
http://blog.naver.com/bvr1978?Redirect=Log&logNo=70074081185
미생물학 5판, 라이프 사이언스, 김경민 ,2003년도판, p108~p110
대학미생물학 8판 탐구마당 민경희 p189~ p192
미생물생태학 정재춘 1991년 p351~p362