Fluorescence Quenching
- 최초 등록일
- 2010.09.06
- 최종 저작일
- 2009.10
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소개글
Fluorescence spectroscopy 실험 예비, 결과가 합쳐진 레포트입니다.
많은 시간을 들여서 정말 정성들여 썼고, 그 결과 교수님께 A+ 받은 레포트입니다.
목차
1. 제목
2. 요약
3. Introduction
4. 실험방법
5. 실험결과
6. 고찰
7. 결론
8. 참고문헌
본문내용
이번 실험은 들뜬 상태의 분자가 quencher와의 상호작용을 통해 quencher의 농도가 증가할수록 형광의 세기가 감소하는 fluorescence quenching을 실험적으로 확인하는 것이다.
실험에 사용한 Rhodamine 590은 형광색소로 형광을 방출하는 물질이다. 그러나 quencher가 존재하면 형광의 세기가 줄어들게 되는 fluorescecne quenching 현상이 발생한다. 이번 실험에서 quencher로 사용한 NaI는 dynamic quenching을 유발하는 물질로, 직접 fluorescence를 측정하기 전에도 형광 색소의 색이 NaI(quencher)의 농도가 진할수록 본래의 색을 잃고 붉어짐을 통하여 quenching 현상을 관찰할 수 있었다.
NaI 용액의 농도에 따른 Signal 값을 측정한 결과 quencher인 NaI의 농도가 증가함에 따라 형광의 세기가 감소한다는 것을 알 수 있었다. 이로서 quencher의 농도가 증가함에 따라 quencher가 들뜬 상태의 분자와 상호작용을 더 많이 하여서 형광의 발생을 감소시켰다는 것을 확인할 수 있었다. 그리고 실험 data를 토대로 Stern-Volmer equation 을 이용하여 [Q] vs Vf,0/Vf graph를 그려본 결과, y절편은 이론값인 1보다 큰 1.02로 측정되어 2.04 %의 오차를 나타내었고, 기울기인 는 88.97로 측정되었다.
형광 발광은 용매, 온도, pH, 점성도 등에 영향을 받는데, 이번 실험의 결과에 있어서는 큐벳을 만질 때의 손의 온도, laser가 아닌 다른 빛의 흡수에 의해서 오차가 생겼을 가능성이 있다. 또한 PMT에 표시되는 signal 값이 약간의 변동이 있어 data 측정 시 이 부분에 있어서도 오차가 생겼을 것이다.
참고 자료
- The principle of instrumental analysis, Skoog, 2007
- Physical Chemistry 8th, Atkins, Oxford, 2006
- An introduction to fluorescence spectroscopy, Schulman, Stephen G
- http://www.sbs.soton.ac.uk/staff/agl/Fluorescence.pdf
- http://chemistry.rutgers.edu/grad/chem585/lecture2.html
- http://www.pti-nj.com/LaserStrobe/TechNotes/IntensityLifetimeMeasurments.pdf