전기영동원리와 전기영동 종류

소개글

전기영동의 원리와 전기영동의 종류에 대해 조사한 레포트입니다.
필요하신 분들은 유용하게 쓰셨으면 좋겠습니다.

목차

1. 실험목적
2. 실험기구
3. 실험방법
1) DNA 추출
2) 전기영동 방법
4. 관련이론
ꊱ 전기영동의 원리
ꊲ Polyacrylamide 젤 전기영동
ꊳ 전기영동의 종류
ⓛ DNA의 겔 전기영동
② 펄스장겔 전기영동(PFGE)
③ 변성기울기 겔 전기영동(DGGE)
5. 참고문헌

본문내용

1. 실험목적
- 생체조직으로부터 추출한 단백질을 Polyacrylamid Gal Electrophoresis(PAGE)를 이용하여 단백질은 분리하고 크기를 측정한다.

2. 실험기구
- 갯기름나물 잎, 막대사발과 막대, 액체질소, 1.5ml tube, DNA mini prep kit, pipet (2, 10, 100, 100㎕), column, cetrifuge, voltexing, hot block, timer, gel plate, agarose, 전기영동장치, 1x TAE buffer 1kb ladder, 6x load dye, EtBr, transilluminator

3. 실험방법
1) DNA 추출
① 약 200㎕의 식물 조직 또는 50㎎의 건조된 조직을 액체 질소를 이용하여 곱게 마쇄하여 깨끗한 1.5ml 튜브로 옮긴다. 가급적이면 녹지 않도록 주의한다.
② 400㎕의 PL buffer와 10㎕ RNase A를 첨가하여 voltex를 이용하여 강하게 섞어준 뒤 65℃에서 15분간 정치시켜 분해하도록 한다. 이 때 간격으로 교반하여 반응이 더욱 잘 되도록 한다.
③ 반응 시간 종료 후, 200㎕의 PP buffer를 첨가하고 강하게 흔든 후, 얼음 속에서 5분간 정치시켜 단백질 침전을 유도한다.
④ 이후, 14000rpm으로 10분간 원심 분리한다. 이때, 새로운 1.5ml 튜브와 컬럼을 준비한다.
⑤ 원심 분리 후, 상층액 300㎕를 새로운 튜브로 옮기고, 1.5배의 PB buffer(450㎕)를 첨가하여 피펫을 이용하여 섞어준다.
⑥ 컬럼에 섞어준 샘플 용액 650㎕를 옮긴 후, 10000rpm으로 30초간 원심 분리하고 컬럼을 빠져나온 용액은 버리고 남은 샘플 용액을 다시 한번 동일한 방법으로 반복한다.

참고 자료

- 응용미생물학실험, 유주현·변유량, 효일, 2007, 226p~
- 일반생물학(7판), Willey sherwood Woolverton, 김영민 외8명, 라이프사이언스, 2008, 350p