2D electrophoresis

소개글

2D electrophoresis에 대한 발표자료입니다.

목차

1. 2D-정의
2. D 실험방법
3. D의 장단점
4. Result

본문내용

1. 2D-정의
proteomics의 핵심기술로써, 현재 수천개의 단백질을
동시에 분리 할 수 있는 유일한 실험 기법.
2D?
원리1
단백질의 amino acid에 따라 질량과 PI
(ISOELECTRIC POINT) 값이 다른 원리를 이용한 기법
원리2
IEF + SDS-PAGE
(PI값에 따른 분리) (질량에 따른 분리)
2. 2D 실험방법
2D gel
sample
preparation
IPG Gel 에서
IEF 를 실행
IEF 한
IPG Gel 을
SDS-PAGE
실행
Staining
Protein spot을
해석
2D 실험방법
2. 2D 실험방법 (1) 2D gel sample preparation
2D gel
sample
preparation
(1) Sample 의 성분은 2-D 결과에 중요한
영향 끼침
(2) sample의 pre-purification: protein의
uncontrolled loss 가능
(3) Protein의 modification을 피하기 위해 sample은
최소한으로, cold 상태로, 빠른 시간 내에 처리
(4) 너무 많은 salt는 isoelectric focusing을 방해
2. 2D 실험방법 (2-1) Isoelectric focusing (IEF)
IEF
Isoelectric point (pI)에 따라 분리하는 방법
- Net charge: amino acid side chains과 amino- ,
carboxyl-terminal의 모든 negative, positive charge의 합
Isoelectric point (pI): protein이 zero인 net charge를
가진 특정 pH
2. 2D 실험방법 (2-1) Isoelectric focusing (IEF)
proteomics의 핵심기술로써, 현재 수천개의 단백질을
동시에 분리 할 수 있는 유일한 실험 기법.
장 점
1. gel에 loading할 수 있는 단백질양의 적어 spot을
찾더라도 분석이 불가.

참고 자료

없음