배지 만들기

소개글

배지 만들기와 세균 배양에 관한 실험

목차

1. 실험 목적
2. 실험 재료
3. 실험 방법
4. 실험 결과

본문내용

1. 실험 목적
미생물을 배양하고 동정하기 위하여 영양분의 조성을 맞춰준 배지를 만들어 보고 미생물을 배양해 본다.


2. 실험 재료
LB broth, Bacto agar, DW, 메스실린더, 압력밥솥, 면봉, 100ml 플라스크, 버너, 부탄 가스, Weighing boat, 약수저, 알코올 램프


3. 실험 방법

1) 형질 전환
(1) competent cell을 20ul(~25ul)에 지난주에 뽑았던 DNA를 1ng 넣었다.
(2) 1초간 voltexing 하였다.(약하게)
(3) 42도에 45초 정도 heatshock을 주었다.
(4) 1초간 voltexing 하였다.(약하게)
(5) LB plate에 tube 내용물을 뿌려주었다.
(6) 유리 spreader로 도말한 후 37도에서 12~16시간 incubation시켰다.

2) 배지만들기
(1) 플라스크의 100ml 정도의 선까지 오도록 압력밥솥에 물을 넣었다.
(2) 배지 100mL 기준으로(4-5명 분량) LB Broth 2.5g, Bacto agar 2.0g 질량을 재서 넣었다.
(3) 물을 100mL 넣고 흔들어서 섞어준 다음 압력밥솥에서 15분 끓였다.
(소리가 난 후 15분)

참고 자료

1) 서울대학교 생명과학부 핸드아웃 및 ppt 자료 ‘Transformation’
2) Campbell, ‘생명과학’, 8th edition, 바이오사이언스, 2008
3) 네이버, www.naver.com