DNA cloning (ligation) Restriction analysis of plasmid DNA

목차

제한효소(restriction enzyme)
●절단 후 모양은 3가지가 가능하다.
● 회문구조

본문내용

제한효소(restriction enzyme)




제한효소란 DNA 분자의 특정 염기서열을 인지하여 이중가닥 DNA를 절단하는 균주 특이성을 갖는 endonuclease이다. 이것의 원래 기능은 세포 내로 침입해 오는 virus나 외래 DNA를 절단, 제거함으로써 그것이 복제되는 것을 막기 위한 박테리아의 자기방어 기구라 할 수 있으며, 자신의 DNA는 methylation시켜 외부의 DNA와 구분하여 보호한다.
제한효소는 크게 Ⅰ, Ⅱ, Ⅲ군으로 분류되며 우리가 흔히 쓰고 있는 것들은 회문구조를 가진 짧은 염기쌍(4 - 6개가 가장 흔함)을 인식하는 Ⅱ군에 속하는 효소이다.
제한효소는 세균의 세포로부터 분리하여 실험실에서 유전자를 포함하고 있는 DNA 조각을 조작하는 데 사용할 수 있다. 이 때문에 제한효소는 DNA 재조합 기술에서 필수적인 도구로 사용된다.
제한효소는 뉴클레오티드 염기들(이중나선의 DNA 분자를 이루는 4가지 기본 단위인 아데닌시토신티민구아닌)의 짧은 특정 배열을 인식한다. 이러한 부위들은 인식 배열(recognition sequence)이라 부르며, DNA 전체에 무작위로 분포하고 있다.

●절단 후 모양은 3가지가 가능하다.

같은 효소로 잘라진 부위는 같은 끝을 가지고 있으므로. 예를 들어 DNA를 EcoRI으로 자르고 다른 DNA를 EcoRI으로 잘라서 결합시키면 새로운 재조합 DNA(recombinant DNA)가 만들어지게 된다.

참고 자료

http://biochemistry.yonsei.ac.kr/biochem_molecular/gene_cloning_14.php
http://blog.naver.com/gungju0916?Redirect=Log&logNo=120048037805
http://cfs10.tistory.com/upload_control/download.blog?fhandle=YmxvZzI3NjYxNUBmczEwLnRpc3RvcnkuY29tOi9hdHRhY2gvMC80Ny5qcGc%3D
http://blog.daum.net/lgduke/5689512