소개글
인진삼물탕의 항염효과 실험에 관한
레포트의 introduction 입니다
목차
◉ LPS의 염증반응
◉ lipopolysaccaride (LPS)
◉ iNOS와 NO
◉ Cyclooxygenase (COX)
◉ SDS-PAGE
◉ SDS
◉ Western blot
◉ Western blot의 원리
◉ house keeping gene
◉ 단백질 정량화 방법
본문내용
1. 서론
염증반응은 생체에 이물질이 감염 또는 침입하였거나 물리 화학적 손상을 입었을때 이를 방어하기 위한 국소적 현상이지만, 과잉의 생체방어 반응은 염증 국소 주위에 있는 정상조직을 손상시켜 질환을 일으킨다. 이러한 염증을 유발할 수 있는 물질 중 하나인 lipopolysaccharide(LPS)는 그람 음성균의 세포 외막에 존재하며, 대식세포 또는 단핵구에서 염증성 매개물질의 증가를 유발하는 것으로 알려져있다. 특히 대식세포는 LPS의 자극에 의하여 inducible nitric oxide synthase(iNOS)가 발현되어 NO를 생성하게 된다. 또한 COX-2와 같은 염증인자를 생산하여 염증을 유발한다.
인진삼물탕은 『傷寒圖歌活人指掌』에 실린 茵蔯梔子黃蓮三物湯의 이명으로, 『醫學入門』과『東醫寶鑑』에서는 "黃疸에 小便不利가 겸한 것을 치료 한다."고 하였고, 黃蓮, 山梔子 및 茵蔯으로 구성되어있다.
황달 때 오줌이 잘 나오지 않는 것을 치료한다. 인진 12g, 치자 8g. 황련 8g을 물 500~600cc 정도 붓고 끓여 반으로 줄면 3번 나누어 하루에 다 마신다.[동의보감]
특히 茵蔯은 최근 연구에서 LPS에 의한 세포손상 및 간손상, 신경아세포의 세포자멸사, 간 섬유화를 억제하며, 항염증 효과 등 여러 가지 약리작용이 있는 것으로 보고되고 있고, 黃蓮은 안구건조증, 항균작용, 山梔子는
Western blot의 원리
기본 원리는 전기영동과 blotting, 그리고 항원-항체반응이다. 우선 단백질의 혼합물로부터 특정 단백질을 검출하기 위해서 전기영동을 이용하여 크기 별로 분리한다. 이 과정에서 단백질을 순수하게 크기별로 분리해 내기 위해서, 단백질의 단위 질량당 전하량와 3차원적 구조를 모두 같게 해줘야 한다. SDS-PAGE(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis)의 경우에는 SDS를 이용하여 단백질이 모두 단위 질량당 같은 정도의 음 전하를 띠게 하여, 각각의 단백질간의 전하 차이를 제거하고, 단백질의 이차원적, 3차원적 구조를 깨뜨려서 모양의 차이로 인한 이동 속도의 변화를 없게 해준다. 따라서 SDS-PAGE를 하면 단백질은 크기에 따라 음극으로부터 양극으로 이동하게 되는데 작은 크기의 단백질이 큰 단백질보다 빠른 속도로 이동하여 단백질이 크기에 따라 분리 된다. 단백질을 크기 별로 분리해낸 후에 단백질을 gel에서 membrane으로 이동시킨다.
이 과정에서도 단백질의 전하 특성을 이용하여, - electrode 쪽에 gel을, + electrode 쪽에 membrane을 놓아서 단백질이 membrane으로 이동하게 된다. 이 방법을 통해 크기 별로 분리된 단백질이 그대로 membrane으로 이동한다. membrane으로 옮긴 후에 찾고자하는 단백질에 대한 항체를 이용하여 그 단백질을 검출한다
참고 자료
대한병리학회편, 병리학, 서울: 고문사 2003, p.98
강재성외 29명 역. 세포분자면역학(4판) 서울 : 범문사; 2002, p23-4, 240-3, 567-8
Dr. 아보의 면역학 입문, 아이프렌드, 아보도로우 ,2007년 ,79p~88p
면역생물학, 라이프사이언스 ,김태규, 2004년 ,493p~525p