Western Blot (Immunoblast)

소개글

생화학 Western Blot (Immunoblast) 실험레포트입니다

목차

1. Introduction

2. Materials and Methods

3. Result

4. Discussion

5. Reference

6. Question

본문내용

1. Introduction
1) Known; 지난 실험에서는 SDS-PAGE를 이용하여 단백질을 전기영동 했다. 이를 통해 처리된 단백질을 분리하고 한쪽은coomassie blue staining을 하고, 다른 한쪽은 western blotting을 하였고 coomassie blue staining의 결과를 통해 aliqout내의 내용물과 단백질을 확인하고 그 단백질의 분자량등을 알아낼 수 있었다.Western blot은 이번주 실험으로 이어진다.

2) Unknown; 지난 시간엔 Western blot의 간단한 기작만을 알아보았는데 자세한 기작과 원리를 알지 못한다.

3) Question / Goal; Western blot을 이용하여 지난 시간처럼 aliqout내의 내용물과 단백질을 확인하는 것이 이번 실험의 목표이다.

4) Approach; Western blot의 원리인 항원 항체 반응을 이용하는데, 지난 실습 시간에 nitrocellulose membrane에 붙여서refolding 시켜둔 단백질에 primary antibody(anti-GST)와 secondary antibody(anti-goat IgG)를 넣어주는데 이 secondary antibody에는 alkaline phosphatase가 cross-link되어 있어BCIP/NBT가 발색이 되어 우리 육안으로 확인할 수 있다.

참고 자료

없음