미생물-10. Moleculartechnology PCR법 과 전기영동
- 최초 등록일
- 2010.01.16
- 최종 저작일
- 2008.05
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소개글
미생물 실험중, Moleculartechnology인 PCR법 과 전기영동 실험을 하고 작성한 레포트
목차
1. 실험 목적 및 원리
2. 재료, 시약, 기구
3. 실험 방법
4. 결과
5. 고찰 및 이해
6. 참고문헌
본문내용
1. 실험 목적 및 원리
PCR(polymerase chain reaction)법은 Molecular biology를 이용한 것이다. 열을 가하여 2개의 사슬로 나누어진 DNA에 ‘프라이머’라고 하는 짧은 DNA를 추가하여 냉각하면 프라이머가 DNA에 결합하고 여기에 DNA polymerase라는 효소를 더하면 프라이머 부분이 출발점이 되어 DNA가 복제된다. 이 가열과 냉각의 과정을 한번씩 거치면 DNA는 2배가 되며 이 과정을 반복하면 약 1시간내에 DNA는 수십억 배로 불어나게 된다. 이러한 방법으로 DNA를 인위복제하는 것이 바로 PCR법이다. PCR법은 과학 수사나 친자 감별 등에 자주 이용되는 DNA 지문 분석(DNA fingerprinting)에 이용되기도 하며, 유전병을 판별하는 데에 이용하기도 한다. 또 오래된 고생물이나 멸종 생물의 희소 DNA를 증폭하기 위해서도 이용되며 생물의 종 간 DNA 비교를 위해 널리 이용된다. 따라서 이번 실험은 Molecular biology의 하나인 PCR법을 배워, 보다 Molecular biology를 이해하는데 의의를 두고 있다.
2. 시료, 시약, 기구
균주(Staphylococus.aureus, Salmonella spp), water bath, 원심분리기, 피펫, premix, primer, agarose gel, sample buffer, marker
3. 실험 방법
ⅰ. DNA extraction
① 표준 균주가 배양된 배지를 1.5㎖ 취하여 E-tube에 넣은 뒤, centrifuge(8000rpm, 10분) 하여 cell을 모은다.
② pellet(원심분리를 하였을 때 바닥에 cell이 뭉쳐있는 부분)에 증류수 1㎖를 넣고 균을 풀어준다(suspension).
참고 자료
John Garbutt, 『Essentials of Food Microbiology』, Arnold, 1997
이갑상, 『미생물학 분자생물학사전』, 대학서림, 1997
