DNA Purification from Gram-Positive Bacteria & Gel electrophoresis

소개글

이 레포트는 학교 도서관에서 자료를 찾아가며 썼기 때문에 principle이 알찹니다,
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목차

#서론
1. DNA Purification
2. DNA 분리 방법
< 화학적 방법 >
3. 효소의 종류
4. 전기영동
5. 전기영동 실험 시 주의사항

#재료 및 방법
< 실험기구 및 재료 >
< 실험과정 및 방법 >

#결과 및 고찰

#참고문헌

본문내용

#서론
1. DNA Purification
유전체 DNA는 세포가 가지고 있는 DNA 전부를 일컫는 말이다. 세포는 세균같은 원핵세포와 효모, 곰팡이 및 고등생물 같은 진핵세포로 나눌 수 있다. 진핵세포에는 원핵세포에 존재하지 않는 여러 종류의 막구조가 존재하는 등 구조가 훨씬 더 복잡하다는 점에 주의하자. 세포로부터 유전체 DNA를 분리하는 방법은 그 유전체 DNA를 어떤 목적에 사용할 것이냐에 따라 다르다. 즉, 복잡한 과정을 사용하여 순도 높은 DNA를 분리하는 방법과, 과정은 간단하나 순도 낮은 DNA를 분리하는 방법이 있을 수 있다.
순도와 농도 모두를 높이기는 어렵다. 과정이 간단할수록 DNA 소실을 줄일 수 있고, 다른 DNA에 의해 오염될 가능성을 줄일 수 있다는 장점이 있다. 그러나 여타 불순물(단백질, 지질, 탄수화물)이 남아 있을 수 있어 PCR처럼 순수한 DNA를 요구하지 않는 실험에 사용하기 적합한 방법이다. 반면에 Southern blot hybridization처럼 분리한 DNA에 제한효소를 처리하는 등 정교한 실험을 해야 할 경우에는 DNA의 순도가 높아야 한다. 따라서 DNA를 사용할 목적에 따라 다른 DNA 분리 방법을 선택하게 된다.

2. DNA 분리 방법
다양한 유전체 DNA 분리 방법이 있으나 기본 과정은 세포벽과 세포막을 제거해주는 과정과, 제거된 오염물을 DNA로부터 분리하는 두 과정이다. 세포막이나 세포벽을 제거 해주는 과정은 boiling 혹은 freeze-thaw 방법 같이 세포에 열을 가해 용해시키거나 심한 온도 차이를 주어 터지게 하는 물리적 방법과, lysozyme이나 SDS(Sodium Dodecyl Sulphate), phenol과 같은 화학물을 사용하여 세포를 용해하는 화학적 방법으로 나눌 수 있다. 화학적 방법이 DNA의 회수율이 상대적으로 높으며, 장기간 보관이 용이하여 보편적으로 사용된다. 그러나 PCR 실험에는 순도는 낮지만 과정이 간단하여 다른 DNA에 의한 오염을 줄일 수 있는 물리적 방법도 종종 사용되고 있다

참고 자료

- 미생물실험서 / 유민, 김병오, 이혜영 / p54~63, p79-88 / 2007년 / 보문각
- 최신 미생물학 실험서 / 미생물 및 면역학 분과회 / p113~114 / 2001년 / 신일상사
- 응용미생물학실험 / 유주현, 변유량 외 / p226~228 / 2007년 / 효일
- 최신미생물실험 / 오계현, 강형일, 소재성, 송홍규, 이병욱 / p223~225 / 2005년 / 신광문화사
- 미생물의 분류·동정 실험법 / 박진숙, 황경숙, 천종식 / p25~29 / 2005년 / 월드사이언스