[미생물학실험] 미생물 배양법 (배지제조, 균접종법)

소개글

1) 배지 만들기: 미생물 배양에 필요한 배지 제조방법을 익힌다.
2) 균 접종하기: 미생물 실험에서 가장 기본적인 배양기술을 습득한다.

목차

1. 제목( Subject )
2. 실험목적(purpose)
3. 재료 및 기구 ( Material and Apparatus )
4. 실험방법 ( Methods )

본문내용

① 삼각플라스크에 계산된 증류수를 넣는다.
② Balance를 이용해 계산한 시판 배지를 증류수에 넣는다.
③ 상품화된 배지의 pH는 대개 조정되어 있으므로 pH 조정이 필요없다(pH의 조절이 필요하다면 배지를 용해한 다음 50~60℃로 식혀 알칼리는 1N HCl, 산성은 1N NaOH로 조정한다).
④ 삼각플라스크의 입구를 알루미늄 호일로 막고 특별한 지시가 없으면 121℃에서 15분간 고압증기멸귤을 한다(멸균 확인을 위하여 플라스크에 멸균 tape를 붙여 멸균한다. 멸균이 되면 멸균 tape가 흑색으로 변한다.)
⑥ 멸균한 배지를 50~55℃로 식혀 petri dish에 18~20mlTlr 부어 평판배지를 만든다. (배지에 수분이 너무 많이 생기지 않도록 주의)
⑦ 배지가 완전히 굳으면 4℃냉장고에 보관하고, 2~3개의 평판배지를 37℃ incubator에 18~24시간 배양하여 오염여부를 확인한다.

2) 균접종 하기
① 세균을 접종할 영양한천평판배지를 냉장고에서 꺼내 실온이 된 후에 사용한다.
② alcohol lamp에 loop를 화염 멸균 한 후 공기 중에 식힌다.
③ 배양된 균주를 1 loop 취한다.
④ 평판배지 획선 순서에 따라 1번에 획선 배양한다.
⑤ 평판배지를 90도로 돌린 후 1번 구획과 약간 중첩이 되도록 2번 구획에 획선 배양한다.
⑥ 다시 평판배지를 90도로 돌린 후 2번 구획과 약간 중첩이 되도록 3번 구획에 획선 배양한다.

참고 자료

1. 김선희외 7인(2003), 미생물학실습, 서울, 도서출판 고려의학
2. 유주현외 2인(2007), 응용미생물학실험, 서울, 도서출한 효일