HPLC의 원리 및 응용범위

소개글

HPLC의 원리 및 응용범위

목차

1. HPLC의 정의
2. HPLC의 원리
3. HPLC의 응용
(1) HPLC에서의 분리
(2) 정성 및 정량분석
5. 참고문헌

본문내용

HPLC는 High performance liquid chromatography의 약자로써 고성능액체크로마토그래피라고 한다. HPLC는 보통의 액체크로마토그래피에서 입자를 더욱 작게 하고, 가는 분리관을 사용해서 알맞은 압력을 가하여(입자를 작게 하면 액체의 통과가 느려지므로) 용매를 흘리면, 기체크로마토그래피와 같은 속도로, 뛰어난 분리기능을 얻을 수 있다.
HPLC에서는 액상의 한편을 지지체에 코팅 또는 화학결합으로 부착시킨 충진제를 사용하여 충진제와 이동상 사이에서 분배작용을 반복시켜 시료를 분리하는데 이는 충진제와 이동상의 조합에 따라 두 종류로 나눌 수 있다. 그 하나는 극성이 높은 액상을 부착한 충진제를, 이동상으로는 비교적 저극성 용매를 사용하는 경우로 이것을 순상분배 크로마토그래피라 한다. 다른 하나는 역으로 저극성의 액상을 부착한 충진제를 이동상으로는 비교적 극성이 높은 용매를 사용하는 경우로 이것을 역상분배 크로마토그래피라고 한다.

2. HPLC의 원리
고정상과 이동상의 시료에 대한 상호작용으로 시료의 분포비를 변화시켜 각 시료성분이 서로 다른 이동속도로 분리관 내를 통과하게 하여 분리시켜 분리관에서 용출시키는 것이다.
이 용출상태는 광학검출기로 차례대로 검출되어 기록계에 크로마토그램으로 나타내며, 적분에 의해 피크 번호순으로 유지시간과 유지용량의 면적비율이 기록되게 된다.

참고 자료

▶ 최재성, 분석화학, 동화기술, 1993, 503-510
▶ 박기채, 기본분석화학, 탐구당, 2002, 539-543
▶ 채수규 외 6인 공저, 표준 식품분석학, 지구문화사, 2007, 185-189