Amperometry 방법을 이용한 Glucose의 정량 : 예비보고서

소개글

Amperometry 방법을 이용한 Glucose의 정량 : 예비보고서

목차

제목
날짜
목적
이론
기구및 시약
실험방법

본문내용

Apparatus and Regents
H2O2 solution, GOD(Glucose oxidase), Glucose standard solution, Phosphatic buffer solution

H2O2 (Hydrogen peroxide) : mp -0.89℃, bp 151℃, d 1.46, f.w 34.01
순수한 것은 수렴성이 있는 기름 모양의 불안정한 무색액체이다. 상당히 센 산화제, 약간의 환원력이 있다. 용액에 포함된 여분의 H2O2는 수분동안 가열하면 제거될 수 있 다(산소발생).

GOD(Gluconic oxidase)
(3-D-글루코오스 + H2O + O2 → D-글루코산 + H2O2 의 반응을 촉매하는 효소이 다. 이 변화에 의해 과산화수소가 생기므로 일종의 항생물질로 본다. 사상균이나 벌꿀 에서 볼 수 있다. 사상균의 효소는 결정화된 HCN, H2S, NaF에 의해 저해를 받는다. 혈당의 정성정량이나 난분의 갈변방지, 통조림의 산소제거 등에 이용된다.

procedure
step 1. H2O2의 정량
① CWE (Coated wire electrode)를 PBS (Phosphate buffer saline) buffer solution에
담그고 충분히 안정화 시킨다.
② 전극이 안정화되면 미리 계산된 injection volume 대로 주입한다.
③ 수집된 data를 통하여 검정곡선을 그린다.

step 2. Glucose sensing 전극의 제작
① CWE (Coated wire electrode) 를 polishing 한다.
② 30 mg/㎖ GOD (Glucose Oxidase) 와 30 mg/ml Glutaraldehyde (2.5%)를 각각
0.2 ㎖ 씩 1:1로 혼합하여 전극에 dispensing 한다..
③ 친수성 폴리 우레탄 (HPU) 막을 ②에서 dispensing 한 표면을 다 덮을 수 있도록
dispensing 하여 건조한다.

step 3. Glucose 의 정량
① 제작된 glucose 전극을 PBS에 담그고 충분히 안정화 시킨다.
② 전극이 안정화되면 미리 계산된 injection volume 대로 주입하여 전류값을 측정한다.
③ 미지농도의 glucose solution을 injection하여 전류값을 측정하여 전류값에 따른 농도를
계산한다.

참고 자료

없음