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Virus 증식 및 Assay

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최초 등록일
2009.08.05
최종 저작일
2009.06
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소개글

Virus 증식 및 Assay에 관한 실험보고서

목차

Abstract
Introduction
Materials & Method
Result
Discussion
References

본문내용

Abstract
이번 실험에서는 phage one-step growth experiment를 통해 virus를 증식시키고 이것을 분석해보았다. 적당한 MOI값을 갖도록 bacteria와 phage를 섞어 synchronize시킨 뒤(0분), 각각 4, 13, 20, 30, 40, 50, 80분 정도가 경과한 뒤의 sample을 취하고 이것들을 serial dilution했다. 이렇게 시간 경과별로 dilution시킨 phage-infected bacterial suspension을 agar와 섞어 plate에 붓고 배양시켜 생성된 plaque의 수를 관찰했다. 또한, plaque 수를 통해 virus 수(PFU/mL)를 구하고 growth curve를 작성하여 burst size를 구한 결과, 12.887이라는 수치가 나왔다. 약간의 오차를 보이지만 서서히 증가하는 곡선을 그리던 PFU는 30분에서 40분 사이에 급증하여 최대치를 기록했다. 후에 다시 감소, 증가하지만 이는 외부 환경적인 요인에 의한 오차로 생각할 수 있다.

Introduction
바이러스의 생활주기는 종류에 따라 차이가 있지만, 대체로 다음과 같이 이루어진다. 우선, 처음에 바이러스가 숙주세포와 물리적인 충돌을 일으키면 숙주 세포의 표면에 바이러스가 부착 및 흡착한다. 이 때, 세포 표면의 receptor site와 바이러스의 binding site가 특수하게 결합할 수 있어야 한다. 그 다음으로 바이러스의 침입 단계는 바이러스의 종류에 따라 다르다. 대부분의 동물 바이러스는 phagocytosis에 의해 세포 내로 들어가게 된다. 어떠한 바이러스는 외포와 세포막의 융합 및 상호 작용에 의해 침입하기도 한다. 그렇게 숙주 세포에 들어온 바이러스는 외각 단백을 벗어버리고 바이러스의 핵산이 세포질 내 또는 숙주 세포의 핵 내로 들어오게 되는데, 이러한 과정을 해체(uncoating)라 한다. 세포질에 들어온 핵산의 일부는 숙주 세포의 DNA 또는 RNA polymerase에 의해 초기 mRNA를 생성하고 이 mRNA를 이용해 복제에 필요한 효소를 합성함으로써 바이러스 생활사에 필수적인 단위 성분을 복제하는 과정을 거치게 된다. 새로운 바이러스들이 완성되면 바이러스 효소에 의해 새로운 바이러스들이 숙주 세포 밖으로 방출된다.

참고 자료

- Acheson, Nicholas H. / Fundamentals of Molecular Virology / Wiley / 2007 / pp8-11
- Lansing M. / 김영민 역 / 일반미생물학 / 라이프사이언스 / 2003 / pp332-335
- 한국미생물학회 편찬 / 미생물학 실험서 / 1998 / pp199-202
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