단백질 분석 (결과)

소개글

두 가지 방법을 이용해 단백질을 분석하는 실험을 하였다.
첫 번째로 SDS-PAGE를 이용하였다.
separating gel과 stacking gel을 만들어 굳힌 후 loading하고 coomassie blue로 staining하였다.
각 loading한 band는 flow through, washing, 두 개의 elution, 총 4개의 band로서 각각의 특성에 맞게 band의 경향이 나타나는 것을 관찰하였다.

두 번째 방법으로 SPR을 이용하였다.
DR5와 TRAIL의 interaction 정도를 알아보기 위한 것이었다.
sensor chip 으로는 CM5를 사용하였고 여기에 DR5를 먼저 고정화 시킨 다음 TRAIL을 흘려 sensogram을 얻는 과정으로 진행하였다.
sensogram을 통하여 kd, ka, Kd 값을 얻음으로써 두 단백질이 interaction 하는 정도를 수치적으로 확인하였다.

목차

◆ Abstract
◆ Introduction
◆ Material
◆ Result
◆ Discussion
◆ Reference

본문내용

◆ Abstract


두 가지 방법을 이용해 단백질을 분석하는 실험을 하였다.
첫 번째로 SDS-PAGE를 이용하였다.
separating gel과 stacking gel을 만들어 굳힌 후 loading하고 coomassie blue로 staining하였다.
각 loading한 band는 flow through, washing, 두 개의 elution, 총 4개의 band로서 각각의 특성에 맞게 band의 경향이 나타나는 것을 관찰하였다.

두 번째 방법으로 SPR을 이용하였다.
DR5와 TRAIL의 interaction 정도를 알아보기 위한 것이었다.
sensor chip 으로는 CM5를 사용하였고 여기에 DR5를 먼저 고정화 시킨 다음 TRAIL을 흘려 sensogram을 얻는 과정으로 진행하였다.
sensogram을 통하여 kd, ka, Kd 값을 얻음으로써 두 단백질이 interaction 하는 정도를 수치적으로 확인하였다.



◆ Introduction


SDS-PAGE를 통해 단백질의 상태, 즉 단백질의 분자량, 순도, 농도 등을 알 수 있다.
분자량은 loading된 marker와의 band 위치를 비교하여 알 수 있고,
순도는 band의 개수에 따라 알 수 있으며,
농도는 이미 농도를 알고 있는 다른 단백질 band의 두께와 비교함으로써 알 수 있다.
비록 SDS-PAGE는 정확한 정량적인 값으로는 위 사항들을 알아낼 수 없지만 대략적으로
용이하게 알아보기 위해 자주 쓰이는 방법이다.

참고 자료

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- 발효공학, 성낙계, 형설출판사, 1999, pp.74-75.

- 효소화학, 안용근, 청문각, 1993, pp.98-100.

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- 최신 환경 미생물학, 송홍규 오계헌, 東和, 1994, pp.121-123.

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