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트립신에 의한 단백질(카제인)의 분해

*유*
최초 등록일
2009.05.28
최종 저작일
2007.11
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소개글

1. 효소 실험을 익힌다.
2. micro 피펫의 사용법을 마스터 한다.
3. 시간을 설정한 실험을 익힌다.
4. 원심분리기의 사용법을 이해한다.
5. 효소의 성질을 이해한다.

목차

1. 실험제목
2. 실험날짜
3. 실험목적
4. 실험원리
5. 시약 및 기구
6. 실험방법
7. 결과
8. 고찰
9. Q & A

본문내용

1. 실험제목
트립신에 의한 단백질(카제인)의 분해

2. 실험날짜
2007년 11월 23일

3. 실험목적
1. 효소 실험을 익힌다.
2. micro 피펫의 사용법을 마스터 한다.
3. 시간을 설정한 실험을 익힌다.
4. 원심분리기의 사용법을 이해한다.
5. 효소의 성질을 이해한다.

4. 실험원리
프로테아제(protease)는 단백질 분자를 구성하는 폴리펩티드 결합을 가수분해 하는데, 그 결과 단백질 분자는 분해되어 저분자량의 펩티드가 생긴다. 이와 같은 단백질의 가수분해는 소화관의 소화 작용뿐만 아니라 세포내의 단백질 대사에도 중요한 역할을 한다.
트립신은 췌액에 함유된 프로테아제로서 단백질 펩티드 결합의 아르기닌 및 리신 잔기의 C 말단의 펩티드 결합의 가수분해를 촉매 하는 소화효소이다. 트립신의 활성을 측정하는 방법에는 여러 가지가 있지만 본 실험은 카제인을 기질로 하여 일정시간을 반응시킨 후 단백질 변성제를 첨가하여 반응을 정지시키고 원심분리 후 단백질 분해결과 생긴 상청부에 있는 저분자 펩티드에 대하여 흡광도를 측정하여 단백질 분해 정도를 측정한다.

5. 시약 및 기구
① 카제인
카제인은 유(乳)의 주된 단백질로 우유에는 2.5∼3%, 사람의 모유 속에는 약 1% 포함되어 있다. 우유 중에는 카제인칼슘(Casein-calcium)으로서 존재 하며 인산칼슘과 결합하여 카제인칼슘, 인산칼슘복합체를 이루어 콜로이드상태의 입자로 분산되어 있다. 이 입자를 카제인미셀(Casein micelle)이라 부르는데 이 입자의 약 95%가 단백질이고 그밖의 약 5%가 칼슘, 무기인산으로 구성되어 있다. 둥글게 생긴 카제인미셀의 지름은 40,300nm으로 우유 1L중에는 5∼15×1012개가 존재하고 있다. 카제인은 ph 4.6∼4.7 상태에서 탈지유로부터 분리 생성한 것으로 단일의 단백질이 아니다. 전기이동을 거치면 ph, 구성원소, 분자량 모두 약간의 차이가 있는 α, β, γ 3성분으로 분류된다. α성분을 더 처리하면 여러 형태의 카제인으로 분리되는데 특히 카제인은 다당류와 결합하여 응유효소(凝乳酵素) 레닌(Rennin)과 반응하면 카제인 전체가 파라카제인(Paracasein)이란 변성단백질의 복합체가 된다.

참고 자료

http://100.naver.com/100.nhn?docid=156569
http://kin.naver.com/db/detail.php?d1id=11&dir_id=110202&eid=N40tDcaRquzuaI2t15nLoAyN
+HJE30Kj&qb=xKvBpsDO
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