형질전환

소개글

일반생물학실험-형질전환 레포트입니다.

목차

1. Title

2. Date

3. Name

4. Proposal - Principles & Introduction

본문내용

4. Proposal - Principles & Introduction

미생물학 실험을 수행하는 데 있어서 가장 기본이 되는 재료가 DNA이므로 많은 양의 DNA를 확보하는 것이 무엇보다 중요하다. 이를 수행하기 위해 외부 DNA를 숙주 세포 내로 도입시키는 방법인 형질전환(Transformation)을 이용하게 된다. 이 방법은 박테리아 세포에 물리적 내지는 화학적 자극을 주어 Plasmid DNA를 받아들일 수 있는 상태로 만들어, DNA가 세포 내로 들어가게 한 다음, 이들 형질전환 된 세포들을 배양함으로써 이루어진다. Recombinant DNA plasmid가 들어가 있는 E.coli로부터 직접 plasmid를 뽑아보고, 특정 염기서열을 인식하여 잘라내는 제한효소를 사용해 직접 DNA를 잘라보는 실험을 첫 주에 진행하고, 이를 전기영동을 통해 크기를 확인하는 실험을 두 번째 주에 진행함으로써 분자 생물학적인 실험에서 기본이 되는 DNA 관련 실험에 대해 이해할 수 있다.

-Transformation(형질 전환)
형질변환·형전환·형변환 등이라고도 한다. 형질전환은 1928년 영국의 그리피스가 폐렴쌍구균을 이용하여 실시한 실험이 계기가 되어 발견되었다. 폐렴쌍구균·파라이질균·인플루엔자균·뇌척수막염균·대장균 등의 박테리아에서 볼 수 있는 현상이다.
폐렴쌍구균을 예로 들면, 다당류로 이루어진 두꺼운 막, 즉 협막을 가진 S형균으로부터 DNA를 추출하여 이것을 다당류성 협막을 가지지 않은 R형균에 작용시키면 R형균의 일부가 S형균으로 변한다. 이것은 S형 세균의 DNA가 R형 세균 속에 들어가서 유전자 발현을 하기 때문이다. 전환을 일으키는 데 필요한 DNA의 최소량은 약 10만분의 1mol이며, DNA의 sigle strand를 주는 것보다도 double strands를 주는 것이 전환을 일으키기 쉽다.
이 실험을 통하여 형질전환 실험에 의하여 유전자의 본체가 DNA라는 것이 밝혀졌다.

참고 자료

Comparative analysis of the DNA staining efficiencies of different fluorescent dyes in preparative agarose gel electrophoresis (2005), Huang Q, Fu WL, Clin Chem Lab Med. p.841∼842
starr 생명과학 제5판 (2005), 홍영남 외 공역, 라이프사이언스, p.224~225