효소의 작용에 미치는 온도, salt, pH의 영향
- 최초 등록일
- 2009.05.20
- 최종 저작일
- 2008.04
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소개글
일반 생물학 실험-효소의 작용에 미치는 온도, salt, pH의 영향
목차
1. Title
2. Date
3. Name
4. Proposal-Principles & Introduction
본문내용
4. Proposal-Principles & Introduction
효소는 화학 반응에서 자신은 변화하지 않으면서 반응 속도를 빠르게 혹은 느리게 하는 촉매의 역할을 한다. 그러나 단백질로 이루어져 있기 때문에 반응의 범위가 상당히 제한적일 수밖에 없다. 일정 온도 이상을 벗어나거나 pH가 너무 낮거나 높을 경우 효소를 구성하는 단백질의 변성이 일어나 제 기능을 발휘할 수 없다.
오늘 실험에 쓰이는 효소는 -amylase로 녹말의 1-4 glycosidic linkage 가수분해를 촉매한다. α-amylase에 의한 녹말의 가수분해 과정에서 처음 단계에서는 덱스트린과 더불어 비교적 큰 각종 올리고당이 생성되며 시간이 지남에 따라 덱스트린의 분자량은 감소한다. 분자량이 큰 덱스트린은 녹말과 마찬가지로 요오드와 반응하여 푸른색을 나타내나 분자량이 작은 덱스트린은 적갈색을 나타내고 분자량이 훨씬 작은 덱스트린은 요오드에 의해 착색되지 않는다. 따라서 요오드 시약으로 녹말의 가수분해 정도를 확인할 수가 있다.
amylase의 작용이 온도와 salt조건, pH조건에 따라 어떤 영향을 받는지 조사하고 최적조건을 찾자.
5. Materials
-amylase (from Bacillus amyloliquefaciens), 1% satarch 용액, 0.1N Iodine용액, pH 3.0, 7.0, 10.0 TE buffer (Tris-EDTA buffer), 증류수, 5%, 10%, 20% 용액, 항온수조(water bath), 시험관, 시험관대, pipette, 얼음, 온도계, voxter mixer
6. Methods
1. 효소의 작용에 미치는 온도의 영향
1) 6개의 시험관에 ①~⑥까지 labeling 한다.
2) 각 시험관에 2㎖의 녹말용액, TE buffer(pH 7.0) 1㎖, D.W 1㎖을 넣는다.
3) ①②번 시험관은 4℃(얼음), ③④번 시험관은 40℃(water bath), ⑤⑥번 시험관은 70℃(water bath)에서 5분간 incubation한다.
참고 자료
Directed evolution of a bacterial -amylase: Towards enhanced pH-performance and higher specific activity, Cornelius Bessler 외, University of Stuttgart, p.4
Biology 8th Edition, Campbell, Benjamin-Cummings, p.74, p.155
현대 생명과학의 이해, 이광웅, 2004, p. 150~157