조선대 동물조직학 중간고사

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1. ex) 소의 간을 채취하여 실험할 때 어떻게 할 것인가?
조직 표본 제작법
- 염색 전 저리과정
1) 고정 : 채취시 모습, 상태 그대로 보전 위해
– 포르말린 (포름알데하이드 37%용액)
① 세포의 물질대사 중지
② 병원 미생물 죽여 부패 방지
③ 자가분해 효소 억제 -> 세포와 조직 파괴 차단
④ 단백질 분자 교차결합, 변성시켜 조직 단단하게 함.

2) 포매 : 절편을 만들기 위해 조직을 단단하게 하는 과정
① 탈수 : 조직은 친수성이기 때문에 파라핀(소수성)이 잘 스며들지 X
-> 탈수 과정을 거쳐 파라핀이 잘 스며들게 하기위함
농도를 점차 높여 100% 이르는 알코올에 순차적으로 통과
② 투명화 : 표본을 녹인 파라핀으로 침투시키기 전 표본 내에서 알코올을 제거하는 과정
- 유기용매(소수성)는 알코올, 파라핀 둘 다와 섞이는 성질 => 유기용매가 알코올 대체
③ 파라핀(녹인 촛농)에 포매
-> 포매 후 꺼내 말림 -> 굳음
④ 절편 : 마이크로톰에 끼우고 강철칼로 표본 자름 -> 알부민 사용하여 슬라이드글라스 접착 -> 프레파라트 완성 *이 때 동결절편

3) 염색
① 재수화 : 염색시약은 친수성 -> 파라핀이 조직에 침투되어 있으면 염색 불가능
=> 다시 유기 용매 이용해 파라핀을 제거하고 다시 높은 농도의 에탄올 ~ 0% 에탄올까지 통과시켜 알코올이 다시 침투하게 함
- 헤마 톡실린 : 물 속에서 표본 슬라이드 염색 -> 재수화 후 염색
- 에오신 : 물보다 알코올에서 더 잘 녹음 -> 알코올에 순차적으로 탈수 -> 알코올에서 염색 => 탈수화 후 염색

참고 자료

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